RSC96(大鼠雪旺细胞)

雪旺细胞RSC96细胞是原代提取大鼠的外周神经系统雪旺细胞经长时间培养后自发转化而成的。RSC96细胞环核苷酸磷酸二酯酶1（Cnp1）、（CNPase）阳性；层粘连蛋白阳性；髓鞘相关糖蛋白（Mag）蛋白和mRNA阴性；髓鞘碱性蛋白（Mbp）蛋白和mRNA阴性；髓鞘蛋白零（Mpz）（Charcot Marie Tooth神经病1B）蛋白和mRNA阴性；外周髓鞘蛋白22（Pmp22）mRNA阳性，蛋白阴性；S100钙结合蛋白β（神经）（S100b）蛋白阳性。2002年12月提交到ATCC的RSC96细胞污染了支原体，后代细胞通过BM细胞周期蛋白处理21天消除支原体。处理后6周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测，结果都呈阴性。贴壁；神经元神经细胞样(梭形或圆形有触角)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；该细胞是原代培养的大鼠雪旺细胞经长时间培养后自发转化而成的。2002年十二月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代通过BM 细胞周期蛋白处理21天消除支原体。 处理后六周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测，结果都呈阴性。1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）RSC96(大鼠雪旺细胞)“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力zui好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。雪旺细胞；自发永生贴壁细胞