NCI-H460人大细胞肺癌细胞

NCI-H460人大细胞肺癌细胞是从一位大细胞肺癌患者的胸水中建立的。NCI-H460细胞表达的p53 mRNA易于检测，水平与正常肺细胞相当，未表现出NCI-H460细胞DNA总体结构异常。NCI-H460细胞角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性；神经丝三联体蛋白阴性。

NCI-H460细胞是在1982年由A.F.Gazdar从一位大细胞肺癌男性患者的胸水中建立的。与正常肺细胞相比，NCI-H460细胞的p53 mRNA表达水平易于检测，并且未表现出DNA总体结构异常。NCI-H460细胞角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性，神经丝三联体蛋白阴性。NCI-H460细胞可以用于3D细胞培养、高通里筛选、癌症和毒理学研究。

复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1） 来源：肺癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长上皮细胞样(多边形成片生长)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；

NCI-H460人大细胞肺癌细胞可用于尼古丁对NCI-H1975和NCI-H460细胞促进增殖作用及对PI3K/Akt通路的影响研究。

1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）大细胞肺癌；胸腔积液转移；男性贴壁细胞