C4-2B 人前列腺癌细胞

C4-2B，人前列腺癌细胞上皮样细胞呈多角形，尺寸更为规则，贴附在基质上呈散在斑片状生长。
产品名称： C4-2B
中文名称：人前列腺癌细胞
细胞数量：1*10^6
组织来源：前列腺癌；左锁骨上淋巴结转移；男性
细胞种属：人
生长特性：贴壁
细胞污染： HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养基：1640，90%；FBS，10%；双抗。
传代方法：1:2-1:4
培养条件：空气, 95%; CO2, 5%。温度: 37℃

C4-2B细胞是人前列腺癌细胞C4-2的骨转移亚系。C4-2B细胞可以应用于前列腺癌致瘤性、雄激素非依赖性增殖展和骨转移研究。

细胞传代
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
复苏细胞
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞运输
干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶）

上皮细胞样(多边形成片生长)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）前列腺癌；左锁骨上淋巴结转移；男性；50岁贴壁细胞