Aspartate aminotransferase ELISA Kit
| 中文名称 | Aspartate aminotransferase ELISA Kit |
|---|---|
| 中文同义词 | 谷草转氨酶(AST)ELISA试剂盒;GOT)ELISA试剂盒;牛 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒;鸭 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒;鱼 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒;天门冬氨酸氨基转移酶1ELISA试剂盒;天门冬氨酸氨基转移酶2ELISA试剂盒;大鼠天门冬氨酸氨基转移酶 |
| 英文名称 | Aspartate aminotransferase ELISA Kit |
| 英文同义词 | Aspartate aminotransferase ELISA Kit;Aspartate aminotransferase 1;Aspartate aminotransferase 2;Glutamic-oxaloacetic transaminase 2(AST2;GOT2) ELISA Kit;Human Aspartate Aminotransferase 2;Human AST2 GOT2 ELISA KIT |
| CAS号 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS号 | |
| 相关类别 | |
| Mol文件 | Mol File |
| 结构式 |
Aspartate aminotransferase ELISA Kit 性质
双抗体夹心法本试剂盒应采用双抗体夹心法测定血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中的含量。人1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。 4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。 5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。 6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。可检测样本中人的AST2；GOT2，且与其类似物无明显交叉反应。谷草转氨酶;天门冬氨酸氨基转移酶2（AST2；GOT2）或天门冬氨酸转氨酶，又称AspAT/ASAT/AAT或（血清）谷氨酸草酰乙酸转氨酶（GOT，SGOT），是一种依赖磷酸吡哆醛（PLP）的转氨酶催化天门冬氨酸和谷氨酸之间α-氨基的可逆转移，因此它是氨基酸代谢中的一个重要酶。AST2；GOT2存在于肝脏、心脏、骨骼肌、肾脏、大脑和红血球中。