H22 小鼠肝癌细胞
H22 小鼠肝癌细胞 性质
悬浮;淋巴母细胞H22细胞分离自小鼠腹水,1952年前苏联医学科学院肿瘤研究所以C3HA小鼠诱发的H22肝癌实体瘤的瘤细胞悬液,昆明种小鼠皮下移植后,转腹水瘤。经检测,该瘤株在Km小鼠、615小鼠、C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠体内可以形成实体瘤和腹水瘤。细胞本身是贴壁细胞,因为注射腹水后才变成悬浮细胞,所以体外传代次数较多的细胞会恢复贴壁状态。如果需要体外传代多次,后期建议按照贴壁细胞处理。该细胞系分离自小鼠腹水。圆形/上皮细胞样(圆形或多角形有触角)H22(小鼠肝癌细胞)“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%。接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力zui好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。1.尽量吸干净T25瓶原培养基;2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;4.将培养瓶放入37度培养箱消化;5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)肝癌;C3HA贴壁细胞