BEND.3 小鼠脑微血管内皮细胞

BEND.3 小鼠脑微血管内皮细胞通过用表达多瘤病毒中间体T抗原的NTKmT逆转录病毒载体感染来转化细胞。

bEnd.3细胞是从患有内皮瘤的小鼠的脑组织中分离的内皮细胞，细胞通过使用表达多瘤病毒中等T抗原的TKmT逆转录病毒载体感染转化，通过检测vWF表达和荧光标记的低密度脂蛋白（LDL）的摄取证实了内皮细胞特性。细胞因子和脂多糖（LPS）可以诱导bEnd.3细胞表达淋巴细胞Peyer's Patch高内皮受体、粘膜血管寻址蛋白（MAdCAM-1）和E-selectin。bEnd.3细胞对肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1）或LPS的诱导表现出时间和浓度相关性。MAdCAM-1在未刺激的早期代数的bEnd.3细胞表面表达，不在大于30代的细胞表达。细胞内粘附分子1（ICAM-1）在细胞上持续表达，并且可以通过用LPS、IL-1和TNF-α处理增加表达。血管细胞粘附分子1（VCAM-1）在早期传代时在细胞上持续表达，但在超过30代时不表达。P-selectin可以使用肿瘤坏死因子α（TNF-α）在早期和晚期传代的bEnd.3细胞诱导表达出来，但在超过30代时表达更高。bEnd.3细胞可以用于3D细胞培养和神经科学研究。上皮细胞样

小鼠大脑；小鼠大脑皮层

1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）脑微血管；内皮细胞；BALB/c贴壁细胞