组织解离液
组织解离液 性质
组织解离液是由多种生物酶组成的混合物,可温和、快速、高效地将组织中的结缔组织酶解并释放出细胞,形成细胞悬液。
组织解离液适用于脾脏、肝脏、肾脏、胰腺、胃黏膜组织、胆囊、肿瘤组织等多种组织的细胞分离。
1.组织预处理:取约100mg新鲜组织至无菌离心管中,用眼科剪将组织彻底剪碎至1-2mm³小块;2.解离反应:加入1mL组织解离液,将离心管置于恒温摇床上,37℃、180rpm震荡孵育。不同组织消化时间有所不同(10-60分钟),需根据实际情况调整;
3.细胞收集:孵育结束后,将组织匀浆用70μm无菌过滤器过滤,用细胞培养基冲洗过滤器,收集滤液;
4.细胞清洗:将细胞悬液1200rpm离心5分钟,弃上清;重复清洗一次;
5.细胞重悬:用细胞培养基重悬细胞,取少量观察消化情况。