人外周血单个核细胞

人外周血单个核细胞

中文名称人外周血单个核细胞
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英文名称Human peripheral blood mononuclear cells
英文同义词Human peripheral blood mononuclear cells;Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC;Human Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC cells;Human Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC primary cell;Human Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC cell;Human Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC;Human Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC primary cell line;Human Peripheral Blood Mononuclear ,PBMC primary cells
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分子量0
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相关类别原代细胞-人原代细胞;细胞生物学-原代细胞
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结构式人外周血单个核细胞 结构式

人外周血单个核细胞 性质

人外周血单个核细胞 用途与合成方法

人外周血单个核细胞分离自外周血。外周血单个核细胞( PBMC )即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。目前,主要的分离方法是密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离出不同的细胞。

人外周血单个核细胞分离自外周血,即除骨髓以外的血液。外周血单个核细胞主要包括淋巴细胞和单核细胞两大类。淋巴细胞又可以分为T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)。单核细胞是血液中最大的白细胞,来源于骨髓中的造血干细胞,并在骨髓中发育,当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。在组织中的结构分布上,PBMC是外周血中具有单个核的细胞的混合细胞群体,这些细胞在免疫系统中发挥着重要作用,参与免疫应答、免疫调节以及免疫记忆等过程。

人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5 x105cells/瓶;细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV. 支原体、细菌、酵母和真菌等。

圆形、不规则形

1.取新鲜抗凝 全血(EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝均可)或者去纤维蛋白血液,用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。

2.在离心管中加入适量分离液,将稀释后的血液平铺到分离液液面上方,注意保持两液面界面清晰。

3.室温,水平转子500~1000g,离心20~30min(血液的体积越大所需的离心力越大,离心时间越长,最佳的分离条件需摸索,离心转速最大不超过1200g)。

4.离心后将出现明显的分层:最上层是稀释的血浆层,中间是透明的分离液层,血浆与分离液之间的白膜层即为单个核细胞层,离心管底部是红细胞与粒细胞。

5.小心的吸取白膜层细 胞到15mL洁净的离心管中,10mL PBS或细胞洗涤液洗涤白膜层细胞。250g,离心10min。

6.弃上清,5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min。

7.重复步骤6

8.弃上清,细胞重悬备用。

外周血人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来。半贴壁

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