P3X63AG8.653 小鼠骨髓瘤细胞

B淋巴细胞；浆细胞；骨髓瘤P3X63Ag8.653细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤，但对HAT敏感，可以用作杂交瘤时的融合配体。P3X63Ag8.653细胞能生成但不分泌免疫球蛋白。据报道，P3X63Ag8.653细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型细胞。P3X63Ag8.653细胞可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱、免疫学研究，也是一种合适的转染宿主。悬浮；淋巴母细胞淋巴母细胞样(圆形)1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞；2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；4.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；这株细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤但对HAT敏感。 可以用作杂交瘤时的融合配体。 能生成但不分泌免疫球蛋白。 据报道它是由于缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型。1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力zui好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。1.接种：用含10％胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000－10000个接种到96孔板，每孔体积200ul.
2.P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)培养：同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。
3.呈色：培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul. 继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。
4.比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)生长曲线。半贴壁细胞