LNCAP CLONE FGC人前列腺癌细胞

LNCAP CLONE FGC人前列腺癌细胞是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。LNCaP clone FGC细胞生长极其缓慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后，多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以反复吹吸分散。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。LNCaP clone FGC细胞生长极其缓慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶包装运输后，多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。1） 来源：前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶
2） 形态：上皮细胞样，轻微贴壁（细胞贴壁能力较弱，需使用特殊培养瓶）

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

传代方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

上皮细胞样(圆形、多角形或梭形)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来前列腺癌；左锁骨上淋巴结转移；男性；50岁贴壁细胞