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武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司

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人外周血 PBMC 分离好搭档!Elabscience 10×红细胞裂解液(不含固定剂))现配现用更高效

发布日期:2025/9/23 16:38:01发布人:武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司

在免疫细胞功能研究、肿瘤免疫治疗机制探索等生命科学领域,外周血样本的高效处理是实验成功的关键第一步。然而,外周血中大量红细胞的干扰的问题,常常导致目标细胞(如白细胞、稀有免疫细胞)分离纯度不足、后续染色效率低,严重影响实验数据的准确性。而 10× 红细胞裂解液(货号 E-CK-A105)的出现,为这一痛点提供了高效解决方案,成为科研人员外周血样本制备的 “得力助手”。
 

一、产品核心应用:聚焦外周血样本的精准处理

10× 红细胞裂解液(E-CK-A105)的核心应用场景围绕人及小鼠外周血样本中红细胞的特异性去除展开,尤其适配以下研究方向:
 
  • 免疫细胞分析:如流式细胞术检测外周血中 T 细胞亚群(CD4+、CD8+T 细胞)、B 细胞、巨噬细胞等,通过去除红细胞干扰,提升目标细胞染色的特异性与荧光信号强度,避免红细胞非特异性结合抗体导致的假阳性结果;

  • 胞内因子检测:配合肝素抗凝管使用,可高效处理人外周血样本,为 IL-2、IFN-γ 等胞内因子的检测奠定基础,且能通过优化裂红顺序(先裂红再染色)减少 CD122、CD56 等指标的表达干扰;

  • 白细胞相关功能研究:在炎症机制、感染免疫等研究中,该裂解液可保留白细胞活性(经验证对正常白细胞无显著损伤),支持后续细胞培养、功能验证(如吞噬实验、细胞毒性实验)等操作。

 
需特别注意的是,该产品不适用于禽类红细胞裂解(禽类红细胞结构与人 / 小鼠差异显著,易导致裂解不彻底或目标细胞损伤),且暂未验证对 “红细胞 + 白细胞之外的稀有细胞(如循环肿瘤细胞)活力” 的影响,建议针对特殊稀有细胞样本开展预实验。
 

二、检测原理:特异性裂解红细胞,守护目标细胞完整性

10× 红细胞裂解液(E-CK-A105)的核心原理基于渗透压差异与离子平衡调控
 
红细胞细胞膜对渗透压变化敏感,而该裂解液通过特定浓度的氯化铵(NH₄Cl)、碳酸氢钾(KHCO₃)等成分,构建 “低渗环境”—— 当裂解液与外周血样本按比例混合(1:9 稀释,现配现用)后,红细胞会因渗透压失衡发生肿胀、破裂,释放血红蛋白;同时,裂解液中的缓冲体系可维持溶液 pH 稳定在生理范围(接近血液 pH 7.2-7.4),避免白细胞因渗透压剧烈变化或 pH 波动受损。
 
与传统 “密度梯度离心法去除红细胞” 相比,该方法无需依赖 Ficoll-Hypaque 等密度介质,不仅操作更简便(无需反复离心分层),还能减少密度介质对白细胞活性的影响,尤其适合对细胞活力要求高的实验场景。
 

三、研究背景:为何红细胞裂解是外周血实验的 “必答题”?

外周血由红细胞(占比约 45%)、白细胞(占比约 1%)、血小板及血浆组成。在多数细胞水平研究中,红细胞并非目标对象,但其大量存在会带来多重干扰:
 
  • 流式检测干扰:红细胞的大小、颗粒度与部分白细胞(如淋巴细胞)接近,易在散射光信号上重叠,导致目标细胞群门控困难;同时,红细胞表面可能非特异性结合荧光抗体,拉高背景荧光,降低检测灵敏度;

  • 胞内实验干扰:在胞内因子检测、Western Blot 等实验中,红细胞破裂释放的血红蛋白会与目标蛋白(如细胞因子、信号通路蛋白)竞争结合检测试剂,或影响蛋白提取效率;

  • 细胞分离效率低:大量红细胞会占据离心管内空间,导致目标细胞(如 PBMC)沉淀分层不清晰,分离纯度下降(传统方法纯度可能仅 80%-85%,而经 E-CK-A105 处理后纯度可提升至 95% 以上)。

 
随着精准医学、单细胞测序等技术的发展,对 “外周血样本中微量目标细胞(如稀有免疫细胞、循环肿瘤细胞)” 的检测需求日益增加,而高效、特异性的红细胞裂解技术,成为解锁这些 “微量细胞研究” 的关键前提 ——10× 红细胞裂解液(E-CK-A105)正是基于这一需求设计,填补了 “高效裂红 + 目标细胞保护” 的技术空白。
 

四、产品核心优势:从操作到性能,全方位适配科研需求

  1. 高效便捷,兼容室温操作:无需低温环境,室温(20-25℃)即可完成裂解,且裂红时间短(建议不超过 5 分钟,可通过预实验优化),大幅缩短样本处理周期;同时,10× 浓缩液设计,使用时仅需用无菌水稀释,无需复杂试剂配制,降低操作误差。

  2. 目标细胞保护力强:通过优化缓冲体系,在特异性裂解红细胞的同时,可最大程du保留白细胞活性,支持后续细胞培养、功能实验;且针对流式染色场景,提供 “先裂红再染色”“先染色再裂红” 两种灵活方案 —— 前者减少杂细胞干扰,提升抗体特异性结合效率;后者减少离心次数,适合细胞量少的珍稀样本(如临床微量外周血样本)。

  3. 稳定易储存,运输安全:产品可在 2-8℃条件下稳定保存 12 个月,无需 - 20℃冷冻储存,降低实验室储存成本;运输过程采用冰袋温控,确保试剂活性不受影响,避免因运输条件导致的实验失败。

  4. 成本可控,性价比高:100mL 规格可满足多次实验需求(按 1:9 稀释计算,单次实验用量少),且单价亲民,适合常规实验室长期使用,无需为 “高效裂红” 承担过高成本。

 

五、文献引用:科研成果背书,验证产品可靠性

10× 红细胞裂解液(E-CK-A105)的技术有效性,已在多项高分研究中得到间接印证(其裂红原理与实验设计逻辑,与以下研究中外周血样本处理需求高度匹配):
 
  • 在《CELL》(IF=45.5,DOI:10.1016/j.cell.2024.08.029)发表的 “细胞间纳米管介导的线粒体转移增强 T 细胞代谢适应性与抗肿瘤功效” 研究中,科研团队需对外周血 T 细胞进行精准分离与活性检测,而高效去除红细胞是确保 T 细胞活力与功能的关键步骤,E-CK-A105 的 “裂红保白细胞活性” 特性可完美适配该实验需求;

  • 《Journal of Extracellular Vesicles》(IF=15.5,DOI:10.1002/jev2.12490)中 “通过工程化晚期结构域支架在细胞外囊泡表面展示 αPD-L1 和 αCD3 抗体以激活 T 细胞抗肿瘤免疫” 的研究,需通过流式细胞术检测外周血中 T 细胞的激活状态(如 CD69、CD25 表达),E-CK-A105 可通过 “先裂红再染色” 方案,减少红细胞对 T 细胞染色信号的干扰,提升检测数据准确性;

  • 在《Advanced Science》(IF=14.3,DOI:10.1002/advs.202415227)关于 “二甲双胍整合自组装纳米药物减轻阿霉素诱导的心脏毒性并增强抗肿瘤 efficacy” 的研究中,外周血免疫细胞(如巨噬细胞、NK 细胞)的功能分析是评估药物免疫调节作用的核心指标,E-CK-A105 的高效裂红能力可助力科研人员快速获得高纯度免疫细胞,加速实验进程。

 

六、实验操作小贴士:让裂红效果更精准

  1. 样本处理时效性:人外周血样本采集后,需在 1 小时内进行 PBMC 分离(若使用肝素抗凝管,保存时间不超过 12 小时),避免细胞凋亡影响后续实验;

  2. 裂红时间控制:单次裂红时间建议不超过 5 分钟,不同样本(如新鲜血、冻存复苏血)的红细胞脆性可能存在差异,需通过预实验摸索最佳裂红时间(以 “红细胞裂解彻底且白细胞活力> 90%” 为标准);

  3. 温度与稀释要求:处理 PBMC 样本时,需将样本及裂解液复温至 18-20℃,且裂解液需现配现用(10× 浓缩液用无菌水稀释至 1× 工作液),避免反复冻融导致成分失效;

  4. 无菌操作:全程保持无菌环境,尤其在后续需细胞培养的实验中,可避免细菌污染导致的实验失败。

 
从基础免疫研究到抗肿瘤药物机制探索,10× 红细胞裂解液(E-CK-A105)以 “高效、安全、灵活” 的特性,为外周血样本处理提供了标准化解决方案。选择适配的裂红工具,让每一次实验数据都更精准 ——E-CK-A105,助力科研人员突破样本处理瓶颈,加速科研成果转化!



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