验证小鼠ELISA试剂盒的回收率是评估其准确性的重要步骤，主要通过以下两种方法进行：
方法一：样品前处理时加入标准液
1、样本制备：取待测样本（如血清），加入等体积不含待测物的溶剂制成基础样本，并计算其浓度。
2、加标样本：取相同体积的待测样本，分别加入高、中、低三个浓度的标准液，制成回收样本。
3、检测与计算：用ELISA检测基础样本和三个回收样本，每个样本至少重复3次。回收率计算公式为：
回收率 = (测定回收样本浓度均值 - 测定基础样本浓度均值) / 加入浓度 × 100%。
最终平均回收率为三个浓度回收率的算术平均值。
方法二：样品前处理后加入标准液
1、样本处理：取3个不同样品，每个样品前处理后分别加入高、中、低三个浓度的标准液。
2、检测与计算：每个浓度样本做平行样，低浓度取3个样品回收率的平均值，中、高浓度分别取对应浓度的回收率。
关键注意事项
1、加标体积：需≤原样本体积的10%，避免基质效应影响。
2、回收率范围：优质试剂盒的回收率通常应在80%-120%之间。
3、实验设计：建议结合阴性/阳性对照和稀释线性测试，全面验证试剂盒性能。
通过上述方法可有效验证试剂盒的回收率，确保检测结果的准确性。