线粒体作为细胞的“能量工厂”，通过氧化磷酸化生成三磷酸腺苷（ATP），维持细胞正常生理功能。其功能障碍与神经退行性疾病、心血管疾病、代谢性疾病及恶性肿瘤等重大疾病的发生发展密切相关。因此，精准检测线粒体功能，已成为探索疾病机制与开发新疗法的关键。
在此背景下，Elabscience®推出线粒体通透性转换孔（mPTP）荧光法检测测试盒（E-BC-F064）。该试剂盒突破传统依赖膜电位变化的检测局限，提供了一种更为直接、特异的方法，可实现对mPTP开放的精准观测。
mPTP是位于线粒体内外膜之间的非特异性通道复合物，其开放的主要原因是“线粒体钙超载”，受控于上游多种信号精确调控，并可直接引发下游的细胞凋亡，是调控细胞死亡的关键环节。
图1. 线粒体悬浮液中Ca2+动态变化与mPTP开放的模型示意图[1]
检测原理
Calcein AM进入细胞后生成绿色荧光染料Calcein。Co²+可淬灭胞质荧光，但正常时因mPTP关闭无法进入线粒体。mPTP开放后，Co2+进入线粒体淬灭Calcein荧光，荧光强度与mPTP开放程度呈负相关，即荧光越弱表明mPTP开放程度越高。试剂盒提供离子霉素（Ionomycin）作为阳性对照使用，作用是诱导mPTP的开放，加入之后线粒体内的绿色荧光显著减弱，以验证检测系统的有效性和可靠性。
产品特点
细胞毒性低：Calcein AM毒性低，活细胞状态下也能轻松观察检测。
结果分析简单：荧光强度与mPTP状态线性相关，便于精准量化分析。
仪器兼容性强：流式细胞仪、荧光显微镜兼容，适配实验室现有仪器。
验证数据展示
通过在293T和Hela细胞中分别进行流式细胞仪和荧光显微镜检测，结果显示试剂盒能够清晰区分mPTP的开放状态。
图2. 293T细胞流式细胞仪数据(1×Calcein，1×CoCl2，1×Ionomycin)
图3. Hela细胞荧光显微镜数据(1×Calcein，1×CoCl2，1×Ionomycin)
产品应用
无论是基础机制探索还是药物开发，该试剂盒都能为研究人员提供有力的技术支持，助力更深入的线粒体功能研究。
细胞凋亡机制研究：精准剖析mPTP在内在凋亡通路中的核心作用。
药物筛选与评估：高效筛选能够诱导或抑制mPTP开放的候选药物，尤其在抗肿瘤、心脏保护、神经保护等研究领域。
毒理学研究：评估环境污染物、化学药物等对线粒体的直接损伤。
疾病模型构建：在帕金森病、心肌缺血再灌注损伤等疾病模型中，深入探索线粒体膜通透性改变在疾病发生发展中的作用。
相关产品推荐
为全面解析线粒体相关细胞死亡通路，Elabscience®推荐以下关联试剂盒：
线粒体超氧化物荧光法测试盒（E-BC-F008）
用于检测诱导线粒体损伤与mPTP开放的关键上游信号超氧化物的水平，揭示mPTP开放的上游诱因。
线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）（E-CK-A301）
用于监测线粒体膜电位变化，精准捕捉mPTP开放的下游效应。
以上是关于线粒体通透性转换孔（mPTP）荧光法检测测试盒的介绍，如有疑问可以在评论区或后台留言，Elabscience®将持续分享更多实用研究工具与技术干货，记得关注，一起探索更多细胞实验的奥秘。
参考文献
[1] Wacquier B , Combettes L ,Geneviève Dupont. Dual dynamics of mitochondrial permeability transition pore opening[J].Scientific Reports, 2020, 10(1):3924.