由艾美捷代理Jackson推出的Alexa Fluor® 647AffiniPure® 山羊抗人IgG(Fcγ片段特异性)二抗(货号109-605-190),特异性识别人IgG重链Fcγ片段,适用于流式细胞术、共聚焦显微镜多标记检测等远红光荧光检测实验。产品为冻干粉剂型,经免疫亲和色谱纯化,兼具明确的片段特异性与优异的光学性能。
特异性与反应特性
经免疫电泳和/或ELISA验证,该抗体与人IgG重链Fc段反应,而不与IgG的Fab段结合;未检出针对人IgM、IgA或非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。产品经ELISA和/或固相吸附测试,确保与牛、小鼠血清蛋白的交叉反应最小化,但仍可能与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。Fcγ片段特异性设计使其在需要区分IgG片段或避免Fab段干扰的实验场景中具有明确优势。
抗体形式与优势
本品为完整IgG分子形式,通过免疫亲和色谱从抗血清中分离获得。完整IgG含Fc段及两个经二硫键连接的Fab抗原结合段,为二价结构,平均分子量约160 kDa。完整IgG形式适用于绝大多数免疫检测流程,且成本效益最优。
使用与储存说明
物理状态为冻干固体,储存于2-8°C。按产品规格表指示体积用去离子水复溶,若溶液不澄清需离心处理。工作稀释液须当日配制。未稀释液体在2-8°C条件下可稳定约6周。复溶后长期储存建议分装并于-70°C或以下冻存,避免反复冻融;亦可加入等体积甘油(ACS级或更优)至终浓度50%,于-20°C以液体形式保存。复溶后有效期一年,若检测结果满足预期用途可适当延长。
纯度与缓冲体系
抗体经抗原偶联琼脂糖珠免疫亲和色谱纯化。缓冲液为0.01M磷酸钠、0.25M NaCl,pH 7.6;稳定剂为15 mg/ml牛血清白蛋白(无IgG、无蛋白酶);防腐剂为0.05%叠氮钠。
建议工作浓度
多数应用建议稀释范围为1:100–1:800。由于最佳稀释度受抗原密度、通透性等多种因素影响,实际稀释倍数需经实验确定。
偶联物光学特性与应用选择
Alexa Fluor® 647偶联抗体的最大吸收波长约651 nm,最大发射波长约667 nm。在水性封片介质中,其亮度优于Cy5和DyLight 650。当需要发射于该波长的二抗时,Alexa Fluor® 647和APC偶联二抗是流式细胞术的最佳选择;在共聚焦显微镜多标记检测中,Alexa Fluor® 647偶联物是远红光发射染料的最佳选择。
相比低波长发射染料,Alexa Fluor® 647的显著优势在于生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。但因其发射峰位于667 nm,肉眼观察效果不佳,且无法被汞灯最佳激发,因此不推荐用于常规落射荧光显微镜,最常配以具备相应激发激光器和远红光检测器的共聚焦显微镜进行可视化。在流式细胞术中,Alexa Fluor® 647偶联物是别藻蓝蛋白(APC)偶联物的低成本替代方案。
文献参考
Combining antibody conjugates with cytotoxic and immune-stimulating payloads maximizes anti-cancer activity.
In Molecular Oncology on 1 May 2026 by Wang, T., Koo, D. J., et al.
Engineering tandem VHHs to target different epitopes to enhance antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity.
In FEBS Open Bio on 1 May 2026 by Xu, Y., Jiang, H., et al.
In Vivo Auto-tuning of Antibody-Drug Conjugate Delivery to Maximize Efficacy Using High-Avidity, Low-Affinity Antibodies.
In Molecular Cancer Therapeutics on 2 April 2026 by Kopp, A., Dong, S., et al.