一、产品概述

由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗人53BP1多克隆抗体（货号：A300-272A），特异性识别人53BP1蛋白中间区域（第350~400位氨基酸）。53BP1是DNA双链断裂（DSB）损伤应答通路中的关键早期响应因子，在DNA修复检查点激活及修复蛋白招募中发挥核心作用。该抗体经严格验证，适用于免疫组织化学、免疫沉淀及蛋白免疫印迹等应用，是DNA损伤修复与肿瘤抑制机制研究的理想工具。

二、产品规格与质量参数

项目 | 规格

靶标 | 53BP1（TP53BP1）

验证种属 | 小鼠、人类

宿主/克隆性 | 兔多克隆（Whole IgG）

免疫原 | 人53BP1蛋白（NP_005648.1）第350~400位氨基酸区域对应的重组表位肽段

纯化方式 | 抗原亲和纯化（固定化表位特异性支持物）

浓度 | 1000 µg/mL（A280法测定，1 mg/mL IgG吸光系数1.4）

缓冲体系 | Tris-柠檬酸-磷酸盐缓冲液，pH 7~8，含0.09%叠氮化钠（防腐剂）

储存条件 | 2~8°C（请勿冷冻）

有效期 | 自收货之日起1年

三、应用与推荐稀释比例

应用体系 | 推荐稀释/使用浓度 | 关键操作备注

蛋白免疫印迹（WB） | 1:10,000 ~ 1:25,000 | 推荐使用3~8% Tris-醋酸凝胶进行大分子量蛋白分离；封闭液/抗体稀释液：5% Milk-TBST；一抗孵育过夜（4°C）

WB（细胞裂解液直接检测） | 按WB范围 | 二抗推荐抗兔IgG重+轻链抗体（如A120-101P）

WB（IP后检测） | 按WB范围 | 二抗推荐抗兔IgG轻链HRP偶联物，封闭液中加5%正常猪血清以减少重链干扰

免疫沉淀（IP） | 6 µg/mg 总蛋白裂解液 | 每mg裂解物使用6 µg抗体

免疫组织化学（IHC） | 1:1,000 ~ 1:5,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行热诱导抗原修复（适用于FFPE切片）

四、靶点生物学背景

53BP1（p53结合蛋白1）是DNA双链断裂损伤应答通路中的关键早期响应因子，其核心功能包括：

损伤感应与信号放大：DSB发生后，53BP1被迅速招募至损伤位点，通过ATM依赖性和非依赖性途径参与下游效应蛋白（如Brca1、Chk2）的磷酸化激活。

修复途径选择：53BP1在同源重组（HR）与非同源末端连接（NHEJ）修复途径的平衡中发挥调控作用，偏向促进NHEJ，其功能异常可导致基因组不稳定性。

层级招募功能：53BP1在DNA损伤位点形成核灶（foci），是Brca1灶形成所必需的上游信号组分，在分级分支通路中协调修复蛋白的有序招募。

五、别名

53BP1；p202；p53-binding protein 1；p53BP1；TDRD30；TP53-binding protein 1；tumor protein 53-binding protein, 1；tumor suppressor p53-binding protein 1

六、使用与储存注意事项

避免反复冻融：本品为液体形式，请于2~8°C持续保存，切勿冷冻。

防腐剂提示：缓冲液含0.09%叠氮化钠，进行活细胞实验或体内应用前请透析去除。

凝胶选择：53BP1分子量较大（~208 kDa），WB检测时推荐使用3~8% Tris-醋酸梯度凝胶以获得最佳分离效果。

阳性对照推荐：电离辐射（如γ射线）或喜树碱处理的HeLa细胞裂解液可诱导53BP1核灶形成，适合作为WB阳性对照。

批次间差异：多克隆抗体可能存在批次间效价差异，建议新批次首次使用前进行滴定优化。

*本手册信息基于出厂批次验证数据，具体实验条件可能因样本类型及实验室环境而异，建议用户根据实际体系进行预实验优化