一、产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的HRP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗体(货号:A90-116P),特异性识别小鼠免疫球蛋白的重链和轻链(H+L)。该抗体经亲和纯化,可结合小鼠IgG的全分子及含有κ/λ轻链的其他免疫球蛋白亚类,适用于ELISA、免疫细胞化学、免疫组织化学及蛋白免疫印迹等多种检测体系,是免疫检测实验中通用的高灵敏度二抗工具。
二、产品规格与质量参数
项目 | 规格
靶标| 小鼠IgG重链和轻链
验证种属| 小鼠
宿主/克隆性| 山羊多克隆(Whole IgG)
偶联物| 辣根过氧化物酶(HRP)
酶/抗体蛋白摩尔比| 4:1
纯化方式| 抗原亲和纯化(琼脂糖珠固定化抗原)
浓度| 1.0 mg/mL(A280法测定,1 mg/mL IgG吸光系数1.4)
缓冲体系| 磷酸盐缓冲液(PBS),含0.2% BSA(稳定剂)及0.05% Pro-Clean 400(防腐剂)
储存条件| 2~8°C(请勿冷冻)
有效期| 自收货之日起1年
三、产品特异性说明
特异性:经免疫电泳和ELISA验证,本抗体特异性结合小鼠IgG重链及小鼠各免疫球蛋白亚类共有的轻链(κ/λ),不与小鼠血清中非免疫球蛋白成分反应。
种属交叉反应性:可能与其他物种(如人、大鼠等)的IgG发生交叉反应,建议在使用非小鼠样本前进行预实验验证。
全分子识别特性:H+L抗体可识别完整IgG分子的多个表位,兼具高灵敏度与一定的广谱性,适合检测含轻链的目标抗体。
四、应用与推荐稀释比例
应用体系 | 推荐稀释比例 | 备注
酶联免疫吸附测定(ELISA)| 1:10,000 ~ 1:100,000 | 适用于直接/间接ELISA及夹心ELISA检测体系
免疫细胞化学(ICC)| 1:50 ~ 1:500 | 适用于固定细胞(包括FFPE细胞涂片及固定透化细胞)
免疫组织化学(IHC)| 1:40 ~ 1:400 | 适用于FFPE组织切片、新鲜冷冻及固定组织切片
蛋白免疫印迹(WB)| 1:5,000 ~ 1:50,000 | 推荐使用含非离子去垢剂的封闭液(如5%脱脂牛奶-TBST)
*注:列表中的部分应用未经厂商实验室逐一验证,但基于二抗通用特性可适用于上述体系,建议用户自行优化。
五、HRP偶联物使用要点
信号检测:HRP催化底物(如TMB、DAB、ECL等)产生化学发光、显色或荧光信号,推荐使用与下游检测平台匹配的底物系统。
底物选择建议:
-WB检测:推荐使用化学发光ECL底物(灵敏度高,适合稀释比1:10,000~1:50,000)。
-IHC/ICC:推荐使用DAB或AEC显色底物,配合苏木精复染。
-ELISA:推荐使用TMB可溶性底物(终止后读取450 nm吸光度)。
防腐剂兼容性:缓冲液含0.05% Pro-Clean 400(非叠氮类防腐剂),不影响HRP活性,可直接用于含HRP底物的检测体系。
稳定性提示:HRP偶联物对光敏感,请避光保存,避免长时间暴露于强光下。
六、使用与储存注意事项
严禁冷冻:本品为液体形式,请于2~8°C持续保存,冷冻将导致HRP活性不可逆丧失及抗体聚集。
工作液现配现用:建议根据实验需求稀释工作液,稀释后请勿反复使用。
封闭液兼容性:WB及IHC实验中推荐使用含蛋白(脱脂牛奶或BSA)的封闭系统,避免含生物素成分的封闭剂(不影响HRP活性)。
内源性过氧化物酶封闭:IHC实验中对含血红素的组织(如肝脏、血液样本),建议使用3% H₂O₂甲醇溶液预处理以消除内源性过氧化物酶背景。
*本手册信息基于出厂批次验证数据,具体实验条件可能因样本类型及实验室环境而异,建议用户根据实际体系进行预实验优化。