一、产品基本规格

项目 | 规格

靶标| 兔IgG重链和轻链

验证反应种属| 兔

适用应用| ELISA、ICC、IHC、WB

宿主| 山羊

克隆性| 多克隆

抗体形式| 完整IgG

同种型| IgG

标记类型| HRP（辣根过氧化物酶）

纯度| 抗原亲和纯化

抗原种属来源| 兔

工作浓度| 1 mg/ml

储存条件| 2 - 8 °C

有效期| 自收货之日起1年

缓冲体系| 磷酸盐缓冲液（PBS），含0.2% BSA和0.05% Pro-Clean 400 |

二、产品制备与质量控制

本抗体由艾美捷代理Bethyl推出，货号：A120-101P，采用亲和层析与酶标记两步法制备，具体流程与质控参数如下：

亲和纯化：使用抗原偶联的琼脂糖珠进行亲和层析分离，确保高特异性识别兔IgG分子。

HRP偶联：纯化后的抗体与辣根过氧化物酶（HRP）进行化学交联偶联。偶联前，免疫球蛋白浓度通过比尔定律（Beer's Law）确定，以1 mg/mL IgG在A280波长下吸光度为1.4作为换算基准。最终酶/抗体蛋白摩尔比未4:1，该比例经过优化以平衡检测灵敏度与偶联物稳定性。

特异性炎症：经免疫电泳和ELISA验证，本抗体特异性识别兔lgG重链，以及与兔其它免疫球蛋白亚型共有的轻链。针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体未检出。

种属交叉反应：本抗体可能与其他物种的lgG发生交叉反应，建议在实验前针对具体样本类型进行预实验验证。

三、推荐实验条件与操作要点

以下为各应用场景的推荐稀释比例及关键操作参数，供实验设计参考。请注意：并非所有列出的应用均已由生产实验逐一验证，建议用户在各实验体系中优先进行梯度稀释预实验以确定最佳功能浓度。

1. 酶联免疫吸附测定（ELISA）

推荐稀释比：1:10,000 ~ 1:100,000

适用范围：适用于直接ELISA、间接ELISA及夹心ELISA体系中兔源一抗的信号检测。

操作建议：建议使用含BSA或脱脂牛奶的封闭液以降低非特异性结合；显色底物推荐使用TMB或OPD体系。

2. 免疫细胞化学（ICC）与免疫组织化学（IHC）

推荐稀释比：1:200 ~ 1:5,000

适用范围：适用于细胞爬片、细胞涂片及组织切片的免疫染色。

操作建议：推荐在抗体稀释液中加入适量BSA或正常血清进行封闭；孵育时间建议为室温1小时或4°C过夜；显色建议使用DAB或AEC底物系统。

3. 蛋白质印迹（WB）

推荐稀释比：1:5,000 ~ 1:50,000

适用范围：适用于兔源一抗检测后的化学发光（ECL）或显色法信号放大。

操作建议：封闭液推荐使用5%脱脂牛奶-TBST或含BSA的TBST；孵育条件建议室温1小时；洗涤步骤建议使用TBST缓冲液，每次洗涤5分钟，重复3~5次以降低背景。

4. 通用操作注意事项

防腐剂兼容性：本抗体缓冲液中含有0.05% Pro-Clean 400作为防腐剂，不影响HRP活性，可安全用于常规免疫检测体系。

储存稳定性：2-8°C冷藏保存，严禁冷冻。冷冻会导致HRP酶活性不可逆损失及抗体聚集。

光敏性：HRP偶联物对光照不敏感，但仍建议避光保存以延长有效期。

信号优化：若背景较高，可适当提高稀释比或延长洗涤时间；若信号较弱，可降低稀释比或延长孵育时间。

四、产品靶标信息

本抗体属于抗重链和轻链（Anti-H+L）类型，设计用于识别完整的兔免疫球蛋白分子整体。免疫球蛋白（IgG）存在于所有体液中，是机体抵御感染的主要效应分子之一。抗H+L型二抗的优势在于同时识别重链和轻链表位，因而能检测包含完整IgG、IgA、IgM等在内的各类兔源抗体，但这也意味着该抗体与来自其他近缘物种如小鼠，大鼠等的lgG分子可能存在一定程度的交叉反应，需根据具体实验体系评估其适用性。

五、应用场景建议

本抗体适用于以下研究领域：

ELISA体系：用于兔源一抗的定量检测，适用于细胞因子，激素，自身抗体等靶标的分析

组织病理学（IHC）：用于石蜡切片或冰冻切片中兔源一抗的信号显色，适用于肿瘤标志物、免疫细胞浸润等研究；

细胞生物学（ICC）：用于培养细胞中兔源一抗的免疫荧光或酶标染色；

蛋白质检测（WB）：用于兔源一抗检测后的化学发光成像，适用于蛋白表达定量、修饰状态分析等。