名称:Cy5-NHS 活化酯
品牌: Medlife
CAS号:1032678-42-4
纯度: COA
货号:PC21411
规格:1mg/价格:¥648.00
规格:3mg/价格:¥1583.00
规格:5mg/价格:¥1575.00
规格:25mg/价格:¥3845.00
链接:https://www.med-life.cn/product/29127.html
一、产品简介
Cy5-NHS 活化酯（Cyanine 5 N-Hydroxysuccinimide Ester，CAS：1032678-42-4）是基于经典花菁染料母核修饰的脂溶性近红外荧光活化标记试剂，分子由 Cy5 共轭荧光母核与 N - 羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）活性基团共价连接而成，兼具高效氨基偶联能力与优异光学性能，广泛应用于蛋白抗体标记、多肽荧光修饰、核酸探针制备、细胞示踪、免疫荧光成像、活体近红外成像等分子生物与光学科研场景。本品科研级纯度≥98%，外观为深蓝色结晶粉末，无同分异构体杂峰干扰、荧光杂质含量极低，批次标记活性、荧光量子产率、光谱参数高度统一稳定。最大激发波长 640nm、最大发射波长 664nm，消光系数高、背景荧光极低；易溶于 DMF、DMSO 等无水极性有机溶剂，微溶于中性缓冲液，不溶于水相体系。密封 - 20℃避光干燥、惰性防潮环境储存，远离高温、强光与潮湿水汽，规范存放条件下稳定保质期可达 24 个月。本品属于高特异性氨基标记荧光染料，依托 NHS 活性酯基团可在温和弱碱环境下与生物分子伯氨基高效共价偶联，形成稳定不可逆酰胺键；相较于传统荧光染料，Cy5 近红外波段可有效规避生物样本自发荧光干扰、组织穿透性强、光稳定性优异，不易荧光淬灭，无需复杂预处理即可直接用于各类生物分子定点荧光修饰，适配高分辨率共聚焦成像、流式检测、活体长效示踪等高精密荧光科研实验场景。
二、作用机制
定点氨基共价标记机制：Cy5-NHS 分子携带高活性 NHS 酯官能团，可特异性识别蛋白质、抗体、多肽、氨基修饰核酸分子表面的伯氨基（-NH₂），在中性、弱碱性无水体系中发生亲核取代反应，脱去 NHS 小分子副产物，形成结构稳定的酰胺键，实现荧光基团定点共价接枝，标记效率高、结合牢固、不易脱落解离。近红外低背景荧光成像机制：Cy5 花菁母核具备长链共轭双键结构，荧光发射处于近红外波段，可有效避开生物样本自体荧光干扰，大幅降低成像背景噪音；同时组织穿透深度优于可见光染料，适配细胞深层成像与小动物活体无创荧光示踪实验。高稳定光学抗淬灭机制：独特硫醚键修饰结构显著提升染料光稳定性，荧光半衰期远优于常规短波长染料，可支持长时间连续成像观测，有效规避实验过程中荧光快速淬灭、信号衰减的问题，保障动态示踪实验数据连续性与准确性。生物分子结构保留机制：标记反应条件温和，无需高温、强酸碱催化，全程不破坏抗体抗原结合活性、蛋白空间构象与多肽生物活性，标记后生物分子可正常维持原有生理功能，适配功能性荧光探针制备与活体活性示踪研究。
三、主要应用领域
1、抗体与功能蛋白荧光标记
对一抗、二抗、酶蛋白、载体蛋白进行定点 Cy5 荧光修饰，用于免疫荧光染色、Western Blot 荧光显色、胶体荧光检测实验。
2、多肽与活性小分子探针合成
标记功能性多肽、靶向小分子药物，构建荧光示踪探针，探究多肽胞内递送、药物细胞摄取、靶向富集分布规律。
3、核酸荧光探针制备实验
对氨基修饰 DNA、寡核苷酸片段进行荧光标记，用于核酸原位杂交、荧光定量检测、基因定位示踪实验。
4、细胞靶向示踪与共聚焦成像
制备荧光标记靶向探针，用于细胞亚结构定位、蛋白胞内分布观测、细胞动态迁移追踪，适配共聚焦显微镜高分辨成像。
5、小动物活体近红外成像研究
依托近红外深穿透、低背景优势，开展活体动物体内药物分布、病灶靶向富集、代谢轨迹长效动态监测实验。
6、荧光生物分析教学实训
生物分子荧光标记原理、荧光探针制备、成像背景优化、光学性能检测等实训课程，标准化试剂保障成像效果稳定、实验重复性强。
四、使用方法与注意事项
使用方法：精准称取 Cy5-NHS 粉末，采用无水 DMF、DMSO 充分溶解配制高浓度避光母液；根据蛋白、多肽标记实验需求，在 pH 8.0–8.5 弱碱性缓冲体系中梯度稀释，避光恒温偶联反应，完成生物分子荧光标记；反应结束后通过透析、超滤去除未标记游离染料，纯化获得荧光标记产物，用于后续成像与检测实验。注意要点：本品 NHS 活性酯对水汽、湿度极度敏感，遇水极易水解失活，称量、配液、反应全程无水避光操作，杜绝水汽接触；全程通风橱内操作，佩戴丁腈手套、护目镜，避免粉尘与有机溶剂体系皮肤黏膜接触；母液需避光分装、-20℃冻存，严禁反复冻融，防止活性衰减、荧光淬灭；不可在强酸、强碱性体系中反应，极易导致染料降解、标记失效；水溶性差，严禁直接纯水溶解配制工作液；仅限实验室体外荧光标记、成像科研使用，不可用于人体临床诊断、活体注射给药；实验有机废液归入危废统一处置；长期强光、高温存放会导致染料共轭结构破坏、荧光失效；标记反应需严格控制 pH 与投料摩尔比，保证标记效率与产物均一性；若粉末变色、溶解浑浊、荧光信号衰减，说明试剂失效，禁止继续使用。
五、总结与展望
Cy5-NHS 活化酯（≥98%）凭借近红外低背景成像、NHS 基团高效偶联、标记位点专一、光稳定性强、生物相容性优异、批次光学参数统一等核心优势，成为生物分子荧光标记、高分辨显微成像、活体示踪探针研发领域的核心标准化荧光科研试剂。有效解决传统染料背景高、易淬灭、标记结合不稳定、破坏蛋白活性等科研痛点，是生命科学荧光成像体系的经典核心标记工具。当前依托 Cy5-NHS 活化酯搭建的蛋白标记、探针制备、细胞示踪、活体成像科研体系，持续支撑靶向药物示踪、免疫荧光检测、分子互作成像、生物探针开发等热点科研课题。随着超高分辨显微成像、活体光学诊断、靶向荧光探针技术不断升级，高纯 Cy5-NHS 活化酯将在高精度生物标记、低背景成像分析、长效动态示踪实验中持续发挥核心作用，为分子生物学、影像药理学、生物分析化学方向基础科研与转化实验提供光学性能稳定、标记效率高、批次统一的标准化近红外荧光标记试剂保障。