血糖含量(GOPOD氧化酶法)检测试剂盒说明书
(货号:ZK-1214W 微板法96样)
一、产品简介:
哺乳动物血液中的葡萄糖称为血糖,是其体内糖的主要运输形式。血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定,调节失衡时出现高血糖和低血糖。
葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚生成有色化合物,通过检测该有色化合物在 510nm的特征吸收峰,进而得出血糖含量。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
试剂一 | 粉体mg×1支 | -20℃保存 | 临用前加2.1mL的蒸馏水溶解备用。 |
试剂二 | 液体18mL×1瓶 | 4℃保存 |
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标准管 | 粉体mg×1支 | 4℃保存 | 用前准确称取2mg粉体即葡萄糖至一新EP管中,再加2mL蒸馏水充分溶解即得1mg/mL标准品,待用。 |
三、所需仪器和用品:
酶标仪、96孔板、天平、移液器、研钵、离心机、蒸馏水。
四、血糖含量检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
1、血清样本:直接检测。
2、上机检测:
① 酶标仪预热30min,设置温度在25℃,设定波长到510nm。
② 做实验前选取2个样本,找出适合本次检测样本的稀释倍数D。
③ 在96孔板中依次加入:
试剂名称(μL) | 测定管 | 空白管 (仅做一次) | 标准管 (仅做一次) |
样本 | 10 |
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蒸馏水 |
| 10 |
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标准品 |
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| 10 |
试剂一 | 20 | 20 | 20 |
试剂二 | 170 | 170 | 170 |
混匀,37℃避光反应30min,510nm下读取吸光值A, △A葡萄糖=A测定-A空白。 |
【注】:1. 若测定管的A值超过1.5,可把样本用蒸馏水进行稀释,稀释倍数D代入计算公式。
2. 若△A低于0.01,可增加样本加样量V2(如增至50μL),则试剂二相应减少,空白
管和标准管的加样体系保持不变。
五、结果计算:
1、血糖含量(mg/mL)=(C标准×V1)×△A葡萄糖÷(A标准-A空白)÷V2×D
C标准---葡萄糖标准品浓度,1mg/mL; 葡萄糖分子量---180;
V1---标准品加样体积,0.01mL; V2---样本加样体积,0.01mL; D---稀释倍数,未稀释即为1;