参数规格:
 产品名称:黑色普雷沃菌PCR检测试剂盒
 型号 :   EY00P948
 产品规格:50T
 产品运输:低温运输
 产品保存:-20℃保存
 产品有效期:一年
 运输:低温
 注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
 实验操作过程:
 一、 CHO DNA 定量参考品的稀释及标准曲线的制备
 用试剂盒中提供的 DNA dilution buffer 将 CHO control DNA 进行梯度稀释, 稀释浓度依 次为 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具体操作如下:
 1.将试剂盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
 轻微振荡混匀,简短快速离心。
 2.取 6 支干净的 1.5ml 离心管,分别标记为 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
 3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分别加入 180ul DNA dilution buffer。
 4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中,  然后涡旋振荡混匀 5- 10s 后短时快速离心 5s,涡旋振荡和快速离心各重复 3 次。
 5,按表 2 依次进行 6 次梯度稀释操作,稀释操作同步骤 4。
                                  表 2. CHO control DNA 的稀释
稀释管  | 稀释体积  | 浓度  | 
SD1  | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer  | 300 pg/ul  | 
SD2  | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer  | 30 pg/ul  | 
SD3  | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer  | 3 pg/ul  | 
SD4  | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer  | 300 fg/ul  | 
SD5  | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer  | 30 fg/ul  | 
SD6  | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer  | 3 fg/ul  | 
二、加样回收质控 ERC 的制备
 根据待测样本的残留量设置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加样浓度  (以制备加 45pg  CHO control DNA 的样本 ERC 为例),操作如下:
 1,取待测样本 100u,加至 1.5ml 干净的离心管中;
 2,加入 1.5ul SD2,混匀,标记为样本 ERC。
 注:样本 ERC 和同批待测样本需一起进行样本前处理。
 三、阴性质控 NEG 的制备

根据实验设置阴性质控,操作如下:
 1,取 100ul 样本基质溶液(或洗脱液)加至 1.5ml 干净的离心管中标记为阴性质控 NEG。 注:阴性质控 NEG 样本和同批待测样本需一起进行样本前处理。
 四、 qPCR 反应液的制备和加样
 1,根据所要检测的标准曲线及待测样本数量,计算所需反应孔数,一般做 3 个重复孔/样。
 反应孔数=  (6 个浓度梯度+1 个无模板对照 NTC+1 个阴性质控 NEG+待测样本×2) ×3 注:待测样本×2 是为了让每个待测样本检测时都同时做样本 ERC 。                  2,根据反应孔数计算本次实验所需的各组分的所需总量以制备 pre-mix:
 2×Taqman master mix=(反应孔数+2) ×15ul    (含有 2 孔的损失量)
 10×CHO qPCR mix=  (反应孔数+2) ×3ul
 RNase-free H2O=  (反应孔数+2) ×2ul
 3,各试剂置于冰上融化,振荡混匀,按表 3 所示进行加样:
                                   表 3.各反应孔加样示例
标准曲线  | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6  | 
NTC  | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer  | 
NEG  | 20ul pre-mix+ 10ul NEG  | 
待测样本  | 20ul pre-mix+ 10ul  待测样本  | 
ERC 样本  | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 样本  | 
注意事项
 1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
 2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
 3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
 4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
 5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
 6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
 7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
 8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
 9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
  CL-0070CRFK(猫肾细胞)5×106cells/瓶×2双(三亚甲基二硫代)四硫富瓦1[有机电子材料]质量规格:>97.0%(HPLC)Bis(trimethylenedithio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]
C2C12, 小鼠肌原细胞四硫富瓦1(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Tetrathiafulvalene
EB病毒转化的B细胞(傣族);KM9403 脐动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL四(甲硫代)四硫富瓦1[有机电子材料]质量规格:>98.0%(T)Tetrakis(methylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]
支气管上皮细胞生长添加物BEpiCGS四(十八烷基硫代)四硫富瓦1[有机电子材料]质量规格:>98.0%(T)Tetrakis(octadecylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 细胞裂解液 (阳性对照) 双(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Dicoumarol
黑色普雷沃菌PCR检测试剂盒阿托伐他汀叔丁基酯Atorvastatin tert-Butyl Ester 质量规格:美国进口  人胃泌素(Gasin)ELISA检测试剂盒HumanGasinELISAKit 96T/48T  ELISAKitS-100B兔子S100B蛋白规格:48T/96T
阿托伐他汀甲酯Atorvastatin Methyl Ester质量规格:美国进口  大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)试剂盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein aibody,OLAb ELISA Kit  Duckcarbonicanhydrase,CAELISAKit鸭子酶(CA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氮卓斯汀-13C,d3Azelastine-13C,d3质量规格:美国进口  英文名称Ratt-PAELISAKit大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)规格:96T/48T  人风疹病毒IGM(RV-IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
N-去甲氮卓斯汀N-Desmethyl Azelastine质量规格:美国进口  钙ATP酶SERCA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25  小鼠α-色素细胞刺激素(α-MSH)试剂盒 Mouse α-Melanocyte Stimulating Hormone,α-MSH ELISA Kit
卡托普利二硫化物(标准品)Captopril Disulfide质量规格:检查  化线粒体溶解试剂盒20  HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit 人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
盐酸阿利克仑Aliskiren 质量规格:美国进口  RatIerferonα,IFN-αELISA试剂盒大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T  HumanOsteogenicGrowthPeptide,OGPELISA试剂盒人成骨生长肽(OGP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
埃博霉素AEpothilone A质量规格:美国进口  小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 ,英文名: PROG ELISA Kit  ELISAKitSS猪生长抑素规格:48T/96T
1-萘乙酰精胺三盐酸1-Naphthylacetyl Spermine Tri质量规格:美国进口  小鼠多巴胺(DA)ELISA检测试剂盒Mousedopamine,DAELISAKit 96T/48T  Humanepidemicparotitis,EPELISAKit人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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                                上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂等为一体的科研产品销售企业,公司自成立以来,秉承""全心全意服务于科研工作者""的企业理念,立足生物科技领域,运用生物技术和科研试剂,发展现代生物科技,为各类大中小医院及其它医疗机构、高等院校、科研院所、企事业单位提供优质的产品,服务生物科技领域的科学研究人员。
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