基本描述
产品名称：Recombinant Taq DNA Polymerase Protein
规格或纯度：EnzymoPure™,His标签,≥95%,见COA
应用：SDS-PAGE, 酶活性检测, Functional Studies
产品介绍：
Taq DNA Polymerase简称Taq酶，是最常用的DNA聚合酶之一。
Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶，分子量是94 kDa ，是将Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因重组表达后，分离提取而得到的。
产品内容：
1. Taq DNA Polymerase ( 5 U/μL )
2. 10×Taq Buffer（Mg2+Plus）：200mM Tris-HCl,500mM KCl,20mM MgCl2,1mM DTT,pH9.3
活性定义：
一个单位的 Taq DNA 聚合酶是在74° C 下30分钟内将10nmol 脱氧核苷酸掺入 DNA 中所需的酶量 。
使用方法：
1. PCR反应体系
试剂 | 体积 |
10×Taq Buffer(Mg2+ Plus) | 5μL |
dNTP Mixture(2.5mM each) | 4μL |
Template DNA | ＜500 ng |
Primer F | 0.2-1.0 μM |
Primer R | 0.2-1.0 μM |
Taq DNA Polymerase(5U/μL) | 0.2μL |
ddH2O | Up to 50μL |
2. PCR反应参数的设置以扩增 1Kb 目的片段为例
步骤 | 温度℃ | 时间 | 循环数 | 预变性 | 95 | 5min | 1 | 变性 | 95 | 30s | 25-35 | 退火 | 55~55(depending on primer Tm) | 30s | 延伸 | 72 | 1min/kb | 最后延伸 | 72 | 10min | 1 | Hold | 4 | ∞ | 1 |
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2.1 PCR 反应的设置需根据模板、引物、PCR 产物的长度和 GC 含量等条件的不同设定不同的 PCR 反应条件包括温度、时间和循环数等。
2.2 STEP4(延伸)的时间设置需根据 PCR 产物的长度进行设置，通常每 kb 产物的延伸时间为 1min。例如PCR 产物的长度为 1kb，则延伸时间可以设置为 1min，PCR 产物的长度为 2kb，则延伸时间可以设置为 2min，以此类推。
2.3 对于初次进行的 PCR，为尽量确保可以扩增出预期的 PCR 产物，可以把循环数设置为 35。对于需进行半定量或定量的 PCR 反应循环数一定要进行适当优化，使 PCR 反应没有达到平台期。
生物活性：Taq DNA polymerase is a heat-resistant enzyme that synthesizes DNA from a single-stranded template in the presence of dNTP and primers, with 5´→3´ DNA polymerase activity and 5´→3´ exonuclease activity.
氨基酸：1-832 aa
蛋白长度：Protein fragments
Accession #：P19821
预测分子量：96 kDa
SDS-PAGE：96 kDa
级别：EnzymoPure™, His标签
产品规格参数
应用：PCR
储存缓冲液：20mM Tris-HCl, 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.5% Tween20, 0.5% Np40, 50% Glycerol, pH8.0
浓度：见COA
储存条件：-20°C储存,避免反复冻融
运输条件：超低温运输
稳定性与储存：在 -20°C 下可稳定保存 1 年。避免冷冻/解冻循环。
CAS编号和信息：9012-90-2
功能和特点
Accession #：P19821
生物活性：Taq DNA polymerase is a heat-resistant enzyme that synthesizes DNA from a single-stranded template in the presence of dNTP and primers, with 5´→3´ DNA polymerase activity and 5´→3´ exonuclease activity.
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PCR: Recombinant Taq DNA Polymerase Protein (A156186)
Recombinant Taq DNA Polymerase Protein (A156186) - PCR
Taq polymerase catalyzes oligonucleotide primer-driven, DNA template dependent incorporation of dNTPs into complimentary DNA strands. It displays both 5′ to 3′ polymerase and exonuclease activities. Use the measurements below to prepare your PCR experiment, or enter your own parameters in the column provided.
Component | 50 μL rxn | 5×Taq Buffer (Mg2+ Plus) | 10 μL | dNTP Mixture (2.5 mM each) | 4 μL | Template DNA | 5 ng | Primer F | 0.5 μM | Primer R | 0.5 μM | Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0.1 μL/0.2 μL | ddH2O | Up to 50 μL |
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关键字： Taq DNA 聚合酶 ; 不含DNA的Taq DNA 聚合酶 ; 重组 Taq DNA 聚合酶蛋白;DNA polymerase I
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