EMSA实验

▼ 服务简介

凝胶阻滞或电泳迁移率实验(Electrophoretic mobility shift assay，EMSA)是一种研究DNA结合蛋白质和相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理，当转录因子与特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。

这一技术最初用于研究DNA结合蛋白质，目前已用于研究RNA结合蛋白质和特定的RNA序列的相互作用。竞争实验中采用含蛋白质结合序列的DNA或RNA探针，和其它相关的探针，来确定它们相互作用的特异性及强度。

如图所示， DNA-复合物比非结合的探针移动得慢;当检测DNA结合蛋白，可用纯化蛋白、部分纯化蛋白或核细胞抽提液;竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA片段和寡核苷酸片段(特异)和其它非相关的片段(非特异)，来确定DNA结合蛋白的特异性;在竞争的特异和非特异片段的存在下，依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

▼ 样品要求

1、活细胞(>2×107)、纯化的蛋白、DNA样品及序列;

2、目的蛋白一抗及其说明书;

3、基因信息、蛋白信息、物种信息;

4、阳性对照样品(尽量提供)。

▼ 服务内容

▼ 案例展示