QIAGEN Plasmid Mega Kit (25) 是一款用于纯化转染级质粒DNA的试剂盒,它能够快速纯化至多2.5 mg的转染级纯质粒或柯斯质粒DNA。该试剂盒利用重力流阴离子交换柱技术,纯化得到的DNA纯度相当于经过两次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。它具有以下特点:
高产量质粒DNA:该试剂盒能够从500 ml至2.5 L的培养基中纯化获得多达2.5 mg的高拷贝质粒DNA。
经济的制备方法:QIAGEN Plasmid Mega Kit 提供了一种成本效益高的质粒DNA制备方法。
使用LyseBlue:试剂盒中包含LyseBlue,能够获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量。
适合多种应用:纯化的质粒DNA适用于多种应用,如转染、克隆和体外转录。
避免使用有毒物质:整个纯化过程避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减少对用户和环境的危害。
操作流程包括将中性细菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge内孵育,数秒内即可过滤澄清,然后将澄清的裂解物上样至阴离子交换纯化柱,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA会选择性地结合上去。利用中盐浓度的洗涤液去除RNA、蛋白质、代谢物及其他低分子量杂质,使用高盐缓冲液洗脱超纯的质粒DNA。利用异丙醇沉淀对DNA进行浓缩并脱盐,并通过离心收集。
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