QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)是QIAGEN公司生产的一款质粒提取试剂盒,主要用于从细菌中高效纯化转染级质粒DNA。该试剂盒采用重力流阴离子交换柱技术,能够纯化至多10mg的转染级质粒或柯斯质粒DNA。产量可达10mg(Giga)、2.5mg(Mega)、500μg(Maxi)或100μg(Midi)高拷贝质粒DNA,具体产量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基等因素。
使用QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)进行质粒提取时,操作简便快捷。通过中和的细菌裂解物直接在QIA过滤器滤芯中孵育,并通过过滤快速清除细菌裂解物,然后将澄清的裂解物加载到阴离子交换尖端,质粒DNA在适当的低盐和pH条件下选择性结合。通过中盐洗涤除去杂质后,在高盐缓冲液中洗脱超纯质粒DNA。最后,DNA通过异丙醇沉淀浓缩和脱盐,并通过离心收集。整个过程中避免了使用有毒物质,如苯酚、氯仿、溴化乙锭和氯化铯等,最大限度地减少了对用户和环境的危害。
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