Mouse IL-4 ELISPOT Kit
组分（Materials Provided）
背景（Background）
众所周知，IL-4是典型的调节性细胞因子，在大量的免疫和非免疫功能中发挥作用。这种细胞因子通常由2型辅助T（TH2）细胞和滤泡辅助T（TFH）细胞在抗原致敏后分泌。小鼠IL-4 ELISpot测定法设计用于在单细胞水平检测小鼠IL-4分泌细胞，可用于定量小鼠IL-4释放细胞的频率。ELISpot检测具有高度的可重复性和敏感性，可用于测量频率远低于十万分之一的反应。ELISpot检测不需要预先体外扩增T细胞，它们适用于仅使用少量原代细胞的高通量分析。因此，ELISpot检测是疫苗开发、细胞因子分泌和监测各种临床试验的有用工具。
应用说明（Application）
该试剂盒用于在细胞水平检测小鼠IL-4。
该产品仅用于科研。
重构方法（Reconstitution）
复溶说明和具体浓度详见分析证书。
存储（Storage）
1.未开封的试剂盒应在2℃-8℃条件下储存。
2.在外包装上找到有效期，不要使用超过有效期的试剂。
3.打开后请尽快用完。
原理（Assay Principles）
ELISpot检测采用定量夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）技术。该试剂盒由预包被的抗IL-4抗体微孔板、阳性刺激物、生物素抗IL-14抗体、链霉抗生物素蛋白-HRP、AEC和缓冲液组成。
您的实验将包括6个简单步骤：
a） 一种针对小鼠IL-4的单克隆抗体已被预涂到聚偏二氟乙烯（PVDF）背衬的微孔板上。
b） 将适当刺激的细胞移入孔中，将微孔板放入37°C的加湿CO2培养箱中一段时间。在此潜伏期内，分泌细胞附近的固定抗体结合分泌的IL-4。
c） 在洗掉任何细胞和未结合的物质后，将对小鼠IL-4特异性的生物素化抗体加入孔中。在洗涤以去除任何未结合的生物素化抗体后，加入与链霉抗生物素蛋白结合的HRP。
d） 清洗平板，向平板中加入用稀释缓冲液稀释的链霉抗生物素-HRP。
e） 清洗盘子并添加AEC。红棕色沉淀在细胞因子定位部位形成并表现为斑点，每个斑点代表一个分泌IL-4的细胞。
f） 斑点可以用自动ELISpot阅读器系统或使用立体显微镜手动计数。
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百普赛斯集团ACROBiosystems Group（股票代码：301080）是成立于2010年的跨国生物科技公司，是为全球生物医药、健康产业领域提供关键生物试剂产品及解决方案的行业平台型基石企业。2021年在创业板上市。百普赛斯集团业务遍布全球，横跨亚洲、北美洲、欧洲，在中国、美国、瑞士等12个城市设有办公室、研发中心及生产基地。目前累计服务客户超6000家，与全球Top 20医药企业均建立了长期、稳定的合作伙伴关系。集团旗下拥有品牌ACROBiosystems百普赛斯、bioSeedin柏思荟、Condense Capital垦拓资本和ACRODiagnostics百斯医学等。