Mouse Interferon-γ (IFN-γ) ELISPOT Kit
组分（Materials Provided）
ID | Components | Size |
RSP002-C01 | Pre-coated Anti-IFN-γ Antibody Microplate | 1 plate |
RSP002-C02 | Positive Stimulus | 60 μg |
RSP002-C03 | Biotin-Anti-IFN-γ Antibody | 50 μL |
RSP002-C04 | Streptavidin-HRP | 50 μL |
RSP002-C05 | Washing Buffer (10x) | 50 mL |
RSP002-C06 | Dilution Buffer (1x) | 50 mL |
RSP002-C07 | AEC Dilution | 25 mL |
RSP002-C08 | AEC Solution A (20x) | 0.8 mL |
RSP002-C09 | AEC Solution B (20x) | 0.8 mL |
RSP002-C10 | AEC Solution C (20x) | 0.8 mL |
产品概述（Product Overview）
干扰素-γ（IFN-γ）是唯一的II型干扰素。这种促炎性细胞因子由活化的T细胞和NK细胞分泌，能够激活巨噬细胞和内皮细胞，并通过影响抗原呈递细胞、T细胞和B细胞来调节免疫应答。辅助T细胞和细胞毒性T细胞产生IFN-γ是Th1型表型的标志。因此，高水平产生IFN-γ通常与宿主针对细胞内病原体的有效防御相关。小鼠IFN-γ ELISpot检测试剂盒旨在用于单细胞水平检测分泌小鼠IFN-γ的细胞，并可定量分析小鼠IFN-γ分泌细胞的频率。ELISpot检测具有高度可重复性和灵敏性，能够检测频率低于十万分之一的应答，且无需事先对T细胞进行体外扩增，仅使用少量原代细胞即可适用于高通量分析。因此，ELISpot检测是疫苗开发、细胞因子分泌研究以及各类临床试验监测中的有用工具。
应用说明（Application）
该试剂盒用于在细胞水平检测IFN-γ。
仅限科研使用。
存储（Storage）
未开封的试剂盒应在收到后于2℃至8℃条件下储存。
有效期见外包装，请勿使用超过有效期的试剂。
开封后的试剂盒应按照组分表储存，有效期自开封之日起为30天。
原理（Assay Principles）
ELISpot检测采用定量夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）技术。该试剂盒包含预包被抗IFN-γ抗体的微孔板、阳性刺激物、生物素标记的抗IFN-γ抗体、链霉亲和素-HRP、AEC底物及各种缓冲液。
您的实验将包括以下6个简单步骤：
a) 特异性针对小鼠IFN-γ的单克隆抗体已预先包被在聚偏二氟乙烯（PVDF）膜底的微孔板上。
b) 将经过适当刺激的细胞加入孔中，并将微孔板置于37°C、湿润的CO2培养箱中孵育指定时间。在此孵育期间，分泌细胞附近固定的抗体结合了所分泌的IFN-γ。
c) 洗去细胞和未结合的物质后，加入生物素标记的小鼠IFN-γ特异性抗体。洗涤去除未结合的生物素化抗体后，再加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的链霉亲和素。
d) 洗涤孔板，加入用稀释缓冲液稀释后的链霉亲和素-HRP。
e) 洗涤孔板，加入AEC底物。在细胞因子定位的位置会形成红棕色沉淀，呈现为斑点，每个斑点代表一个分泌IFN-γ的细胞。
f) 斑点可使用自动化ELISpot读数系统进行计数，或使用体视显微镜手动计数。
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百普赛斯集团ACROBiosystems Group（股票代码：301080）是成立于2010年的跨国生物科技公司，是为全球生物医药、健康产业领域提供关键生物试剂产品及解决方案的行业平台型基石企业。2021年在创业板上市。百普赛斯集团业务遍布全球，横跨亚洲、北美洲、欧洲，在中国、美国、瑞士等12个城市设有办公室、研发中心及生产基地。目前累计服务客户超6000家，与全球Top 20医药企业均建立了长期、稳定的合作伙伴关系。集团旗下拥有品牌ACROBiosystems百普赛斯、bioSeedin柏思荟、Condense Capital垦拓资本和ACRODiagnostics百斯医学等。