花色苷含量检测试剂盒（分光光度法 50T/48S）

植物花色苷含量试剂盒说明书 

分光光度法 50 管/48 样 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素，属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、 花和果实中，使其呈现由红到紫等不同颜色，是植物主要的呈色物质。 

测定原理：

采用 pH 示差法测定花色苷含量，当 pH 为 1.0 时花色苷在 530nm 处有最大吸收峰,而当 pH 为 4.5 时, 花色苷转变为无色查尔酮形式,在 530 处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同 pH 下的 530nm 和 700nm 处 的吸光度值。pH 示差法减少了溶液 pH 和溶剂差异的影响，排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。

需自备仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水 按照烘干样品质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 烘干样品，加入 1ml 提取 液），充分匀浆后转移到 EP 管中，提取液定容至 1 ml，盖紧后 4℃浸提 24 h，8000 g，25℃离心 10 min， 取上清液待测。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上；试剂一和试剂二预热 10min 以上。

2、取 100 µl 上清液和 900 µl 试剂一（相当于稀释 10 倍），40℃水浴 20min，分别测定 530nm 和 700nm 处的吸光值，分别记为 A1 和 A2。 

3、 取 100 µl 上清液和 900 µl 试剂二（相当于稀释 10 倍），40℃水浴 20min，分别测定 530nm 和 700nm 处的吸光值，分别记为 A3 和 A4。 

4、 计算△A=（A1-A2）-(A3-A4)。