二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为 醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
DAO 催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺 生成氧化型邻联茴香胺,在 460nm 处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算 DAO 活性。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、蒸馏水。
粗酶液提取:
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(10 4个):提取液体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细 胞加入 1ml 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g, 4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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