BCA法蛋白质含量测定试剂盒（微量法100T/96S）

BCA 法蛋白含量测定试剂盒说明书 

微量法 100T/96S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理：

碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将 Cu 2+还原成 Cu +；2 分子 的 BCA 与 Cu +结合，生成紫色络合物，在 540-595nm 有吸收峰，562nm 处吸收峰最强。

自备仪器和用品：

台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸馏水。

样品中可溶性蛋白质提取：

1、液体样品：

澄清液体样品可以直接测定。 

2、组织样品：

按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水） 冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心 10min，取上清，即待测液。

3 、细菌、细胞：按照细胞数量（10 4个）：

提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞 加入 1ml 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000rpm， 4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。