中性转化酶(Neutral invertase, NI)试剂盒说明书
微量法 100 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之 一。根据最适 pH,将高等植物 Ivr 分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。 NI 主要存在于细胞质中,负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。
测定原理:
NI 催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算 NI 活 性
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰 和蒸馏水。
粗酶液提取: 按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 提取液), 进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤和加样表:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 510nm,蒸馏水调零。
2、样本测定,(在 EP 管中依次加入下列试剂):
温馨提示:本产品不可用于临床用途,详询客服。
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