"HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
Hek293; HEK-293; HEK/293; HEK 293; HEK;293; 293; 293 HEK; 293 Ad5; Graham 293; Graham-293; Human Embryonic Kidney 293
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
血清作为细胞培养基的重要成分,为细胞生长提供了必需的营养物质和生长因子。当细胞增殖速率异常时,可考虑逐步提高血清浓度至15-20%。这一范围的血清浓度能够为细胞提供更丰富的营养支持,促进其增殖。然而,这一过程必须谨慎进行。建议将血清浓度的提升分为2-3个阶段,每个阶段维持3-5天,让细胞有足够的时间适应新的环境。例如,可以从常规的10%血清浓度开始,先提升至12-15%,观察细胞状态后再决定是否继续提高至15-20%。
【背景信息】
HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱全称为人胚肾293细胞(Human Embryonic Kidney 293 Cells),是生物医学研究中极为重要的工具。这一细胞系最初由Alex Van der Eb和Frank Graham在1970年代通过将5型腺病毒(Ad5)的DNA转染到人类胚胎肾细胞中建立。命名“293”源于Frank Graham进行的实验编号,他在成功建立该细胞系之前进行了293次尝试。
【传代比例】
1:2-1:4(HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞消化注意事项(二):细胞状态:在消化前,应确保细胞处于适宜的状态,如生长密度、形态和活力等。后续操作:消化后的细胞应立即进行后续操作,如传代、分离或计数等,以避免细胞在体外过长时间暴露而导致损伤或死亡。细胞消化是细胞培养中的一个关键步骤,需要严格遵循操作规程和注意事项,以确保细胞的良好分离和后续实验的顺利进行。
细胞经过多次传代后,建立了稳定的体外培养模型且可稳定增殖。这些微小的生命单元在培养瓶中生生不息,恰似一支训练有素的军团,为科学家们科研实验提供着源源不断的创新灵感与技术支持。其价值不仅体现在当前广泛的应用中,更在于它为未来生命科学研究提供的可能性。随着技术的进步和对这一细胞系认识的深入,必将在更多领域展现其独特优势。研究人员在使用时应当充分了解其特性,合理设计实验,并注意细胞培养的质量控制,以确保研究结果的可靠性和可重复性。
【物种来源】
HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化HEK293 Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代步骤(二):终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时,向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞,使其形成均匀的细胞悬液。然后,将细胞悬液转移至无菌离心管中,以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后,轻轻倒掉上清液,用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要,将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中,置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。
直接倒掉上清液能够提高操作效率,节省时间。但这种方式存在一定风险,直接倾倒时较难控制力度和角度,如果操作不慎,容易使细胞沉淀随着上清液一起流出,导致细胞损失,而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中,应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时,建议优先采用移液枪吸走的方式,以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下,可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法,在保证实验质量的同时提高工作效率。
PANC-03-27 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞
Caco 2 Cells;背景说明:细胞株分离自一个原发性结肠癌。当细胞长满时,表现出典型的肠细胞分化的特征。Caco-2细胞表达维生素A酸结合蛋白I和视黄醇结合蛋白II,角蛋白阳性。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞
SK-Mel1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:维持细胞浓度在1×105-2×105,每周补液2-3次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:球形的;相关产品有:PC-3M-2B4细胞、OVCAR-433细胞、Ketr3细胞
L132 Cells;背景说明:胚肺;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞
MCA 205 Cells;背景说明:纤维肉瘤;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
HA-2 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 RIF1 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
D283-MED Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次。;生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁 Cells;形态特性:上皮细胞;相关产品有:MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞
BT-B Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
KMB17 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Verda reno细胞、CNE-2Z细胞、801-D细胞
253JBV Cells;背景说明:膀胱癌;淋巴结转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
P388 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞
NCIH2029 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:5传代;;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
LNCaP.FGC Cells;背景说明:人前列腺癌细胞LNCaP克隆FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离,该患者经确诊为前列腺癌转移。 这株细胞对5-α-二睾酮(生长调节子和酸性脂酶产物)有响应。这株细胞并不形成一致的单层,而是形成集落,在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。它们仅仅轻轻地吸附在基底上,不形成汇合,很快使培养基变酸。生长很慢。传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后,多数细胞从培养瓶底分离,悬浮在培养基中。收到后,在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时,以合细胞再贴壁。;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
P3-X63-Ag8-653 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H250细胞、JKT1细胞、SJSA细胞
HVR-2 Cells(提供STR鉴定图谱)
LaNCE hiPSC-24 Cells(提供STR鉴定图谱)
MuRTE71 Cells(提供STR鉴定图谱)
OS2-RA-R Cells(提供STR鉴定图谱)
RPE1-SS119 Cells(提供STR鉴定图谱)
U-937/CR Cells(提供STR鉴定图谱)
UM57-1 PGD Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 USP18 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
D283-MED Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次。;生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁 Cells;形态特性:上皮细胞;相关产品有:MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞
RPMI.8226 Cells;背景说明:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。;传代方法:按1:2传代,5-6小时可以看到细胞分裂;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:NCIH250细胞、KYSE 50细胞、KMB 17细胞
SUM-159-PT Cells;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
HEK293-A Cells;背景说明:胚肾;腺病毒包装;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
HSC3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1 x 10^5 cells/10cm dish;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞
CAL-78 Cells;背景说明:软骨肉瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
MLA-144 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
Hk-2 Cells;背景说明:该细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2,Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。;传代方法:1:4传代;2-3天换液1次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
ARH-77 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样 ;相关产品有:RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞
NS-1-Ag4-1 Cells;背景说明:这是P3X63Ag8(ATCCTIB-9)的一个不分泌克隆。Kappa链合成了但不分泌。能抗0.1mM8-氮杂鸟嘌呤但不能在HAT培养基中生长。据报道它是由于缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。;传代方法:1:2传代,3天内可长满。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
CAL-85-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞
CALU1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:消化10分钟。1:2。3-4天长满;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞
38C13 Cells;背景说明:B淋巴瘤;C3H/eB;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:半贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:YH细胞、P31-FUJ细胞、Tn5 B1-4细胞
H-522 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
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关键字: HEK293 Cells人胚肾细胞低代次;复苏细胞系;细胞STR鉴定报告;细胞STR鉴定图谱;ATCC|DSMZ细胞库;
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等细胞系