"HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
细胞培养瓶破裂或渗漏是实验室最紧急的情况之一。当发现容器破损时,应立即执行三级处理流程:首先将破损培养瓶放入生物安全柜,用消毒剂浸泡的纱布覆盖裂口;随后将培养物转移至备用培养瓶,转移过程需严格保证无菌操作;最后对工作台面进行彻底消毒。值得注意的是,聚乙烯材质的培养瓶在反复冻融后更易产生微裂纹,建议使用前进行透光检查。对于珍贵细胞系,可预先分装冻存备份,并建立定期镜检制度,每周至少两次检查培养容器完整性。
【背景信息】
HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱293细胞株插入SV40T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。
【传代比例】
1:2-1:4(HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞消化注意事项(二):细胞状态:在消化前,应确保细胞处于适宜的状态,如生长密度、形态和活力等。后续操作:消化后的细胞应立即进行后续操作,如传代、分离或计数等,以避免细胞在体外过长时间暴露而导致损伤或死亡。细胞消化是细胞培养中的一个关键步骤,需要严格遵循操作规程和注意事项,以确保细胞的良好分离和后续实验的顺利进行。
细胞根据其形态和功能可以分为多种类型,其中上皮细胞、成纤维细胞和淋巴母细胞是常见的三种类型。成纤维细胞,或称纤维母细胞,是一种存在于蜂窝组织或纤维结缔组织中的梭形细胞,能够分泌构成细胞外基质(ECM)的结构蛋白。这类细胞最初由德国病理学家鲁道夫·菲尔绍与法国解剖学家马蒂亚斯·杜瓦尔于19世纪中叶描述。成纤维细胞特异性标志物包括FAP(成纤维细胞激活蛋白)、α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)、骨膜蛋白、PDGFRα(血小板衍生生长因子受体α)、胶原蛋白、波形蛋白、纤连蛋白和胸腺细胞抗原1等。成纤维细胞在形态上是扁平的纺锤形细胞,缺乏基底膜,细胞核呈圆形拉长,被巨大的内质网包围。在培养中,它们表现出不同的形态学和生化特征,这取决于其起源位置、分化状态和培养条件。
【物种来源】
HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化HEK293T Cells人胚肾细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
直接倒掉上清液能够提高操作效率,节省时间。但这种方式存在一定风险,直接倾倒时较难控制力度和角度,如果操作不慎,容易使细胞沉淀随着上清液一起流出,导致细胞损失,而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中,应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时,建议优先采用移液枪吸走的方式,以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下,可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法,在保证实验质量的同时提高工作效率。
SU86_86 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞
SW 948 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:5传代,每周换液1-2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:MGc80-3细胞、U-87-MG细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞
RPMI-8226 Cells;背景说明:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。;传代方法:按1:2传代,5-6小时可以看到细胞分裂;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:Human Epithelioma-2细胞、CCRF-CEM细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞
BJA-B Cells;背景说明:Burkitt's淋巴瘤;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Y3Ag1.2.3细胞、NE-1细胞、BC-020细胞
SW1271 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
HAP1 ATG2A (-) 4 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 SLC5A7 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
KYSE180 Cells;背景说明:食管鳞癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
Duke University 145 Cells;背景说明:DU 145 是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到激素敏感性,酸性酶阳性,单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:M619细胞、D-283 Med细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞
NCIN87 Cells;背景说明:NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素释放肽。报道NCI-N87细胞的植板率为4.3%。;传代方法:消化15-20分钟。1:2。4-5天长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
Central Adrenergic TH-expressing a Cells;背景说明:神经;SV40转化;C57BL/6 x DBA/2;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞
HT-55 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
H-524 Cells;背景说明:该细胞1982年建系,源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:圆形细胞;相关产品有:SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
Hs840_T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4—1:8传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
KM12 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Farage Original Line细胞、NCI-H165细胞、SW-839细胞
iBMK BIM-/- A.Hras-C Cells(提供STR鉴定图谱)
Lis34_FAP3 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCCSi008-B Cells(提供STR鉴定图谱)
PathHunter CHO-K1 FXR Protein Interaction Cells(提供STR鉴定图谱)
S1A Cells(提供STR鉴定图谱)
UCLi009-B Cells(提供STR鉴定图谱)
ZP127 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 TSSK4 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
SGC 7901 Cells;背景说明:1979年建系;这株细胞源自一位56岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移灶。RPMI-1640培养12天,细胞开始生长,首次传代10天;31个月中传代186代。免疫抑制的ICR小鼠、乳犬皮下移植成功,家兔、乳犬眼前房移植成功;淋巴结转移,从小鼠皮下侵袭至肌层。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:U-2932细胞、UK Pan-1细胞、P30/0HK细胞
NP69 Cells;背景说明:鼻咽;上皮细胞;SV40转化;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞
EL4 Cells;背景说明:EL4是从用9,10-二甲基-1,2-并蒽在C57BL小鼠中诱导的淋巴瘤中建立的。 能抗0.1 mM 化可的松,对20 mcg/ml PHA敏感。 还有一个亚株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞
PanC1 Cells;背景说明:这株人胰腺癌细胞株源自于胰腺癌导管细胞,其倍增时间为52小时。染色体研究表明,该细胞染色体众数为63,包括3个独特标记的染色体和1个小环状染色体。该细胞的生长可被1unit/ml的左旋天冬酰胺酶抑制;能在软琼脂上生长;能在裸鼠上成瘤。;传代方法:1:2-1:4传代;每周2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;多角形;相关产品有:TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
mRTEC Cells;背景说明:肾小管;上皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
mRTEC Cells;背景说明:肾小管;上皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
SH-SY5Y Cells;背景说明:据报道,该细胞的密度可高达1×106cells/cm2,具有中等水平的多巴胺β羟化酶的活性。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HMEC1细胞、COR L279细胞、ES-2细胞
TMK-1 Cells;背景说明:胃癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞
SK-MEL 28 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:8传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:星形的;相关产品有:NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
H-1105 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞
MT-2 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、SKNO-1细胞、RPTEC TERT1细胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1 Cells;背景说明:睾丸间质瘤;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞
MDA MB 175 VII Cells;背景说明:该细胞源自一位54岁患有乳腺导管癌白人女性的胸腔积液。;传代方法:1:2—1:6传代,每周换液2—3次;生长特性:松散贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞
HTh-74 Cells;背景说明:未分化甲状腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Mel-MeWo细胞、HSC-I细胞、YD-15细胞
SK-MES-1 Cells人肺鳞癌细胞|有STR图谱
GBC-SD+luc Cells人胆囊癌细胞|有STR图谱
KYSE-140 Cells人食管鳞癌细胞|有STR图谱
bEnd.3+RFP Cells小鼠脑微血管内皮细胞|有STR图谱
hTERT-HPNE Cells人正常胰腺导管细胞|有STR图谱
L1210 Cells小鼠淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱
HCC1428 Cells人乳腺腺癌细胞|有STR图谱
Sf9 Cells昆虫卵巢细胞|有STR图谱
HBL-1 Cells人弥漫大B淋巴瘤细胞|有STR图谱
YT Cells人NK细胞白血病细胞|有STR图谱
RPMI-2650 Cells人鼻腔上皮细胞|有STR图谱
BT-483 Cells人乳腺导管癌细胞|有STR图谱
UWB1.289 Cells人卵巢癌细胞|有STR图谱
HCC1359 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
CT26.WT-Luc Cells小鼠结肠癌细胞|有STR图谱
HUVEC+GFP Cells人脐静脉内皮细胞|有STR图谱
MUG-Chor1 Cells人骶骨脊索瘤细胞|有STR图谱
C666-1 Cells人鼻咽癌细胞|有STR图谱
Duck embryo Cells鸭胚成纤维细胞|有STR图谱
U-2932 Cells人B细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱
C8-D1A Cells小鼠小脑星形胶质细胞|有STR图谱
MLO-Y4 Cells小鼠骨样细胞|有STR图谱
RAW264.7+GFP Cells小鼠单核巨噬细胞白血病细胞|有STR图谱
SK-NEP-1 Cells人肾母细胞瘤细胞|有STR图谱
TCCSUP Cells人膀胱癌细胞|有STR图谱
CBRH7919 Cells大鼠肝癌细胞|有STR图谱
Lenti-X293T Cells人胚肾细胞|有STR图谱
SW872 Cells人脂肪肉瘤细胞|有STR图谱
SU-DHL-8-Luc Cells人B细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱
MDA-MB-453 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱
SNU-668 Cells人胃癌细胞|有STR图谱
LEC-1 Cells仓鼠卵巢细胞|有STR图谱
OE33 Cells人食管腺癌细胞|有STR图谱
F9 Cells小鼠畸胎瘤细胞|有STR图谱
HMY-1 Cells人黑色素瘤细胞|有STR图谱
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关键字: HEK293T Cells人胚肾细胞低代;复苏细胞系;细胞STR鉴定报告;细胞STR鉴定图谱;ATCC|DSMZ细胞库;
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等细胞系