原果胶含量检测试剂盒(分光光度法50T/24S)

原果胶含量试剂盒说明书

                                                  分光光度法  50管/ 24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，即原果胶。因其具有良好的乳化、增稠和凝胶作用，在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。

测定原理：

原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，并进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物，在530 nm处有特征吸收峰。

试剂的组成和配制：

自备仪器和用品：

天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、水浴锅、1ml玻璃比色皿、浓硫酸和蒸馏水。

样品处理：

将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和提取液一体积(ml)为1: 20的比列（建议取约0.05g样品，加入1ml提取液一），置于90℃恒温水浴锅中浸提30min，取出冷却后于5000g、 25℃离心10min，去掉上清，沉淀中再加入1ml提取液一重复操作一次，离心后去上清，沉淀中加入1ml提取液二，置于90℃恒温水浴锅中水解1h，取出冷却后于8000g、25℃离心15min，取上清液待测。

测定步骤：

计算公式：

原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C标准×V标) ×△A2÷△A1÷(W÷V样总) =0.25×△A2÷△A1÷W

C标准：标准品浓度，0.25mg/ml；V标：反应体系中加入标准品体积，0.1ml； V样总：加入提取液体积，1ml； W：样本鲜重，g。

注意事项：

1、空白管和标准管只需测定一次。

2、浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热取出后冷却再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。

3、若吸光值超过1，可将样本提取液进行适当稀释再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。

最低检出限为10μg/g。