土壤铵态氮试剂盒说明书
微量法100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
土壤中的铵态氮可被土壤胶体吸附，呈交换性铵状态氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，属于速效性氮素。
测定原理：
土壤中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，在625nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。
试剂组成和配制：
产品名称 | SSQ057-100T/96S | Storage |
提取液：液体 | 110ml | 4℃ |
试剂一：粉剂 | 2瓶 | 4℃避光 |
试剂二：液体 | 8ml | 4℃避光 |
试剂三：液体 | 2ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加4ml双蒸水溶解，现配现用。
自备仪器和用品：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、振荡仪。
样本处理：
按照土壤质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g新鲜土样，加入1ml提取液），振荡提取1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。
测定操作表：
1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至625nm，蒸馏水调零。
2、操作表：
| 空白管 | 测定管 |
样本（μl） |
| 20 |
提取液（μl） | 20 |
|
试剂一（μl） | 80 | 80 |
试剂二（μl） | 80 | 80 |
充分混匀，25℃静置1h |
试剂三（μl） | 20 | 20 |
充分混匀，于微量石英比色皿/96孔板中，蒸馏水调零，测定625nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管。 |
计算公式：
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.1145x + 0.0104，R2 = 0.9976
NH4+—N含量（mg/kg 鲜重）=（△A-0.0104）÷ 0.1145 ÷W
= 8.73 ×（△A-0.0104）÷W
W：样本质量，g
用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.066x + 0.0025，R2 = 0.9977
NH4+—N含量（mg/kg鲜重）=（△A-0.0025）÷ 0.066÷W = 15.15×（△A-0.0025）÷W
W：样本质量，g（为1ml提取液中加入的新鲜土样的质量）。
注意事项：
试剂一必须避光低温保存，配制好的试剂一4℃保存不能超过20天。
浸提液最好在当日完成测定，如果不能完成，可冷冻保存，但不能超过两天。
若△A过高，建议将待测样本使用蒸馏水适当稀释后再进行测定，计算时乘以相应的稀释倍数；若△A过低，建议适当增加样本量后再进行测定，计算时修改相应的样本量。
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