细胞属性:
产品名称 | K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记 | 英文名称 | K7M2WT(K7M2-WT)-LUC:K7M2WTK7M2WTLUC |
编号 | XG-X3648 | 规格 | 1×106 |
组织来源 | BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 来源转移灶: 肺 细胞类型: 成骨细胞; | 形态 | 贴壁细胞 成骨细胞 |
抗原表达: CD31 阳性 [PubMed:1315100] 产物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表达显示其骨家族细胞特性。 在本库通过支原体检测。
1基本特征与来源
细胞来源:
源自BALB/c小鼠的骨肉瘤肺转移灶,属于成骨细胞类型,具有骨肉瘤的典型生物学特性。
形态与标记:
贴壁生长,形态为成骨细胞样,表达CD31阳性。
产物包括骨唾液酸蛋白(BSP)、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglycan等骨家族标志物,证实其成骨分化特性。
基因修饰:
通过慢病毒转染携带萤火虫荧光素酶(Luc)基因,稳定表达荧光素酶,用于活体成像追踪肿瘤生长和转移。
2培养与冻存条件
培养基:
DMEM高糖培养10%胎牛血1%双抗(青霉素-链霉素),气相条件为95%空5CO,温度37℃。
传代与密度:
传代周期3-5天,推荐传代比例1:2至1:6,使用0.25%胰酶-EDTA消化。
传代后密度需达70%-80%再进行分瓶,避免长期超过80%导致分化。
冻存液:
90%胎牛血10DMSO,需现用现配,冻存管干冰运输或复苏后4℃暂存。
3荧光素酶标记特性
构建方法:
通过慢病毒载体(如FugW)整合Luc基因至基因组,结合嘌呤霉素筛选(终浓度2-μg/mL)维持稳定表达。
荧光检测:
荧光素(D-luciferin)腹腔注射后1-2分钟发光,峰值在10-30分钟,持续约3小时,推荐检测时间窗口为注射后15-35分钟。
发光强度与细胞数量正相关,适用于活体成像(IVIS系统)及体外细胞定量分析。
稳定性维护:
长期培养需定期用嘌呤霉素筛选(建议每3代一次),防止荧光素酶基因丢失。
4应用领域
肿瘤模型构建:
原位骨肉瘤模型:通过胫骨或颅骨注射(推荐剂量1×10cells/10μL),模拟人类骨肉瘤的肺转移(成功率>90%)。
皮下移植模型:用于药物疗效评估(如化疗或免疫治疗)。
机制研究:
研究骨肉瘤侵袭转移、血管生成(如VEGF通路)及耐药性。
结合基因编辑技术(如CRISPR敲除抑癌基因p53/Rb),验证特定基因功能。

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关键字: K7M2WT;小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记;K7M2WT(K7M2-WT)-LUC:;
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