商品属性
产品名称
人白细胞介素12p70(IL-12p70)ELISA试剂盒
英文名称
Human IL-12p70 ELISA Kit
检测范围
7.8pg/mL- 500 pg/mL
货号
PH33252
检测原理
采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA):
微孔板预包被人IL-12p70特异性捕获抗体
加入样本或标准品后,IL-12p70与捕获抗体结合
加入HRP标记的检测抗体形成复合物
TMB底物显色(蓝→黄),450nm波长测定OD值,浓度与OD值正相关。
样本要求
适用样本类型:
血清/血浆:建议EDTA或肝素抗凝,离心3000 rpm ×10分钟去除杂质
细胞上清液:离心3000 rpm ×10分钟去除细胞碎片
组织匀浆:按1:9(重量/体积)用PBS匀浆,离心后取上清
(注:避免反复冻融,新鲜样本-20℃/-80℃保存)
试剂盒组成
基础组件(以96孔板为例):
预包被微孔板 ×1块
人IL-12p70标准品 ×1套
HRP-检测抗体 ×1瓶
TMB底物液、终止液、洗涤缓冲液
封板膜、说明书
操作流程
加样:标准品/样本各50μL加入对应孔,37℃孵育1小时
洗涤:PBST洗板5次
加检测抗体:37℃孵育30分钟
洗涤:重复步骤2
显色:加TMB 100μL,避光反应10分钟
终止:加终止液50μL
检测:立即用酶标仪测450nm OD值
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线(建议四参数拟合)
样本浓度通过曲线方程计算
注意事项
灵敏度:典型检出限≤4 pg/mL
特异性:不交叉反应人IL-12/23 p40、IL-23等
精密度:板内/板间变异系数(CV)<10%
有效期:未开封试剂盒2-8℃保存6个月
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