1. 细胞性状
细胞名称
hCMEC/D3 人脑微血管内皮细胞
来源
人脑皮层微血管
类型
人源内皮细胞系
生长方式
贴壁生长
分子特征
表达血脑屏障相关标志物(如Claudin-5、ZO-1、P-gp)
功能
用于研究血脑屏障(BBB)功能、神经疾病机制及药物透过性
培养基及培养条件
专用完全培养基,37°C,5% CO₂
冻存条件
90%FBS + 10%DMSO
2. 细胞简介
hCMEC/D3 人脑微血管内皮细胞(Human Cerebral Microvascular Endothelial Cell Line D3,简称hCMEC/D3)来源于人脑皮层微血管,是目前研究血脑屏障(BBB)的经典细胞模型之一。该细胞通过转染人端粒酶逆转录酶(hTERT)和SV40大T抗原获得永生化特性,从而具备长期传代能力和实验稳定性。形态学上,hCMEC/D3呈典型内皮样贴壁生长,细胞间可形成紧密连接,体现出内皮细胞屏障特性。在分子学水平上,该细胞高表达血脑屏障相关标志物,如Claudin-5、Occludin、ZO-1及外排蛋白P-gp等,能够模拟体内BBB的结构与功能。因此,hCMEC/D3被广泛应用于神经科学、药理学和毒理学研究,尤其适合用于药物透过性及血脑屏障调控机制的研究。
3. 科研与应用领域
(1)血脑屏障功能研究:hCMEC/D3是体外重建BBB的重要模型,用于研究紧密连接蛋白和跨内皮转运机制。(2)药物透过性研究:常用于检测小分子药物、生物大分子或纳米药物的跨BBB通透性。(3)神经疾病机制研究:用于研究阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化等疾病中BBB功能障碍的作用。(4)炎症与免疫研究:hCMEC/D3在炎症刺激下可模拟BBB炎症反应,适合研究神经炎症和免疫细胞迁移。(5)毒理学与纳米医学研究:该细胞常用于评估外源性毒物、环境因子或纳米材料对BBB的影响。
4. 推荐实验方案
(1)通透性实验:利用跨内皮电阻(TEER)测定和FITC-dextran通透实验,评估BBB完整性和通透性。(2)紧密连接蛋白检测:通过免疫荧光或Western Blot检测Claudin-5、Occludin、ZO-1等蛋白的表达水平。(3)药物外排功能实验:检测P-gp、BCRP等外排蛋白活性,评估药物外排作用。(4)炎症模型构建:通过TNF-α、IL-1β等处理细胞,研究炎症对BBB功能的影响。(5)联合共培养实验:将hCMEC/D3与星形胶质细胞、周细胞共培养,建立更接近体内的BBB模型。
5. 技术与性能优势
hCMEC/D3 人脑微血管内皮细胞具有以下优势:(1)来源明确,能模拟人类BBB特性,临床相关性强;(2)表达典型的BBB紧密连接蛋白和外排蛋白,功能完整;(3)永生化处理后,具备长期传代能力,适合重复性实验;(4)可用于药物透过性、炎症反应及毒理学多方面研究;(5)作为经典的BBB模型细胞系,在神经科学与药理学研究中应用广泛。
6. 结论与前景展望
hCMEC/D3 人脑微血管内皮细胞作为经典的血脑屏障模型细胞,广泛应用于BBB功能研究、药物透过性研究及神经疾病机制探索。未来,随着3D培养、芯片技术与多组学的发展,hCMEC/D3将在更复杂的BBB模型构建、个体化药物透过性预测及新型神经治疗策略开发中发挥更大作用。作为一种可靠的人源细胞模型,hCMEC/D3在人脑疾病研究和临床前药物开发中均具有不可替代的价值。
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