细胞属性
产品名称 | SK-MEL-2+LUC人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记 | 英文名称 | SK-MEL-2+LUC:SKMEL2LUC |
编号 | XG-X3539 | 规格 | 1×106 |
组织来源 | 黑色素瘤 | 形态 | 贴壁生长 多角 |
1） 来源：黑色素瘤
2） 形态：多角，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
1. 细胞模型与标记背景
（1）基础特性
亲本细胞：SK-MEL-2（ATCC HTB-68）源自皮肤转移性黑色素瘤，属 BRAF野生型/NRAS突变型（Q61R）模型
标记方法：
稳定转染 萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase） 基因（常用载体：pGL4.51[luc2/CMV/Neo]）
筛选标志：新霉素（G418，常用浓度400-800 μg/mL）
（2）核心优势
活体成像：可动态监测肿瘤生长/转移（灵敏度达100-1000个细胞）
高通量筛选：适用于抗肿瘤药物体外疗效评估（IC50检测）
2. 实验应用方案
（1）体内外检测体系
应用场景 检测方法 关键参数
皮下成瘤模型 活体成像（IVIS系统） D-荧光素150 mg/kg，注射后10分钟
转移模型（肺/肝） 离体器官成像 曝光时间30-60秒（F/stop=1）
体外药物筛选 微孔板发光检测（酶标仪） 底物浓度150 μg/mL，积分时间1秒
（2）标记验证实验
1. **荧光素酶活性检测**：
- 裂解细胞后加入D-荧光素（1mM）
- 化学发光读数（RLU值＞1×10^6/μg蛋白为合格）
2. **稳定性验证**：
- 连续传代10次后检测发光强度衰减（应＜20%）
3. 培养与质控标准
（1）培养体系
培养基：MEM + 10% FBS + 1% NEAA + G418（维持浓度200 μg/mL）
传代要点：
0.25%胰酶消化2分钟（避免过度消化导致标记丢失）
接种密度≥5×10^4 cells/cm2（低密度影响发光稳定性）
（2）质控要求
必须检测：
每月STR鉴定（匹配ATCC HTB-68标准）
支原体检测（建议MycoAlert? PLUS）
功能验证：
裸鼠皮下接种（5×10^5 cells/只）验证成瘤性与发光信号线性关系
公司正在出售的产品：
RNA探针聚合酶标记试剂盒 | AF680标记的促肾上腺皮质激素受体 |
冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒 | 基膜聚糖蛋白抗体 |
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关键字： SK-MEL-2+LUC;人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记;SK-MEL-2+LUC:SKMEL2L;
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