谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(GOT/AST)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT 在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
测定原理:
GOT 催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与 2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定 505nm吸光度的变化,即可计算 GOT 酶活力。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:在 EP 管中加入下列试剂
试剂名称(μL)
测定管
对照管
待测样本
20
煮沸 10min 的待测样本
试剂一
100
蒸馏水
混匀后,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)准确反应 20min
试剂二
混匀后,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)准确水浴 20min
试剂三
1000
混匀,室温放置 10min ,在 505nm 波长处,测各管吸光度 A。ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管需设一个对照管。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!