植物丙二醛(MDA)测定试剂盒/比色法/48T
测定意义:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid ,PUFA), 引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛 MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。
测定原理:
过氧化脂质降解产物中的丙二醛 (MDA)可与硫代巴比妥酸(TBA)缩合,形成红色产物,在 532nm 处有最大吸收峰。因底物为硫代巴比妥酸(Thibabituric Acid TBA)所以此法称 TBA 法。
操作表:
空白管
标准管
测定管
无水乙醇(μl)
50
10nmol/ml 标准品( μl)
待测样本(μl)
工作液(μl)
2000
注 意:
1、部分样本中 MDA 含量较低,可将操作表中的空白管、标准管、测定管的取样量均加大到 100 μl进行测定。
2、附送盖子上带孔的 EP 管 60 个,直接编号后用于操作。
3、水浴时间及温度要固定,反应时间到后立即用流水冷却。冷却后呈色稳定,12 小时内吸光度基本不变。
4 、沸水浴 20 分钟,流水冷却后,转入 96 孔板中的液体量一定要准确,并且不能有气泡。如有气泡可以放一些时间等气泡消失后再测。(最好先将酶标板空板进行扫描)
5、如没有酶标仪,可以用微量比色皿在分光光度计上进行测定。
上海酶联生物科技有限公司
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