大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理，酶标板预先包被大鼠MDA固相抗原，加入待测样本与酶标抗体工作液后，样本中的游离MDA抗原与固相抗原竞争结合酶标抗体，样本中MDA含量越高，固相结合的酶标抗体量越少，底物显色强度越低，终止反应后检测吸光度，依据标准曲线的负相关关系，定量检测大鼠样本中MDA的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒

英文名称：MDA ELISA Kit
货号：Y-E1270

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.1nmol/mL

检测范围：0.5nmol/mL - 50nmol/mL

反应时间：总时长3.5小时，氧化应激指标专属流程

保存条件：2-8℃避光保存，试剂避免氧化

有效期：原装6个月，现配试剂当日用完

显色系统：氧化应激标志物专用显色体系

检测波长：450nm/620nm双波长检测

标准曲线绘制：8低浓度梯度，精细拟合标准曲线

特异性：特异性识别大鼠MDA，与其他脂质过氧化物无交叉反应

重复性：板内CV≤6.5%，板间CV≤8.5%

注意事项：全程避光操作，防止MDA氧化降解；样本新鲜制备，避免久置
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

MDA 标准品梯度稀释，试剂盒室温平衡 32min，排布酶标板标准、样本、空白区域；

每孔加入 50μL 标准品或大鼠血清 / 组织匀浆，空白孔填充稀释缓冲液；

加入 100μL 辣根酶标记抗 MDA 抗体，封板膜密封；

37℃避光孵育 61min，一步孵育完成免疫结合；

洗板液浸泡微孔 40s，拍干，连续洗涤 6 次；

避光添加显色底物混合液 100μL，37℃避光显色 16min；

终止液混匀微孔液体，450nm 读数，计算 MDA 含量。
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