Streptavidin-Texas Red:Texas Red标记链霉亲和素
Streptavidin-Texas Red是将Texas Red荧光染料与链霉亲和素通过特异性化学偶联制备而成的荧光共轭试剂,融合了链霉亲和素-生物素系统的高特异性结合优势与Texas Red染料的优良荧光性能,在免疫荧光成像、流式细胞术、荧光原位杂交等领域具有重要应用。Texas Red作为一种红色荧光染料,具有荧光量子产率高、光稳定性好、背景荧光低等特点,与链霉亲和素结合后,可实现对生物靶标的高效标记与精准检测。
链霉亲和素作为核心结合单元,分子量约66 kDa,四聚体结构使其拥有四个生物素结合位点,结合常数高达10¹⁵ M⁻¹,能与生物素化的靶标分子(如抗体、探针、蛋白等)发生特异性、高亲和力结合,为荧光信号的精准定位提供保障。Texas Red是一种磺化罗丹明类荧光染料,*大激发波长约596 nm,*大发射波长约615 nm,发出明亮的红色荧光,易于与其他荧光染料(如FITC、Cy3等)搭配使用,实现多色荧光成像。Streptavidin-Texas Red的制备采用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化法:首先利用NHS活化Texas Red分子上的羧基,形成活性酯中间体,该中间体可特异性地与链霉亲和素分子表面赖氨酸残基上的氨基发生酰胺化反应,形成稳定的共轭键。偶联反应完成后,通过凝胶过滤层析进行纯化,去除未反应的游离Texas Red染料和杂质,确保产品的高纯度与均一性。优质的Streptavidin-Texas Red标记率通常控制在2-4个Texas Red分子/链霉亲和素四聚体,既能保证充足的荧光信号强度,又不会因标记过多而影响链霉亲和素的生物素结合活性。
应用场景方面,Streptavidin-Texas Red广泛用于免疫荧光成像、流式细胞术分析、荧光原位杂交(FISH)、蛋白质定位研究等实验。在免疫荧光成像中,可先将生物素标记的一抗与样本中的靶蛋白结合,再加入Streptavidin-Texas Red作为荧光二抗偶联物,通过荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察靶蛋白的亚细胞定位与表达水平,其明亮的红色荧光可有效避免与样本自身绿色荧光的干扰,提升成像质量;在流式细胞术分析中,可与生物素化的细胞表面标志物抗体结合,对细胞群体进行分类与定量分析,广泛应用于免疫学研究、临床诊断(如白血病细胞检测)等领域;在FISH实验中,可用于标记生物素化的核酸探针,实现染色体或基因片段的精准定位,助力遗传病诊断与基因表达调控研究。
使用Streptavidin-Texas Red时需注意:储存时应置于-20℃避光密封保存,建议分装储存,避免反复冻融导致荧光基团降解和蛋白变性;使用前需在冰上缓慢解冻,并用合适的缓冲液(如PBS,pH 7.2-7.4)进行稀释,稀释过程中应轻轻混匀,避免剧烈震荡;实验过程中需严格避光操作,尤其是在孵育和成像阶段,减少荧光淬灭;孵育温度建议控制在室温或37℃,孵育时间根据实验需求调整为30-60分钟,确保特异性结合充分;同时,需避免使用含有强氧化剂、还原剂的缓冲体系,以免破坏染料结构与偶联键。
用途:科研
包装:瓶装
产地:西安瑞禧生物科技有限公司

关于我们:
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