检验原理
本试剂盒基于荧光定量PCR技术，针对水痘-带状疱疹病毒疫苗株保守序列设计特异性引物及荧光探针，通过体外扩增检测病毒DNA，适用于临床样本的病原学诊断。
产品名称 | 水痘-带状疱疹病毒疫苗株染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Varicella-zoster Virus (VZV) Vaccine Strain Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3277 |
试剂盒组成
VZV反应液：含PCR缓冲体系及荧光探针
酶液：热启动Taq DNA聚合酶
阳性质控品：已知浓度的VZV DNA（1×10^8拷贝/μL）
阴性质控品：无核酸酶水
自备试剂：DNA模板、10×ROX（根据仪器型号选择）
包装规格：25T/盒或50T/盒
储存条件及有效期
储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。
运输：低温运输。
有效期：12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
LightCycler系列
Bio-Rad、Eppendorf等
样本要求
适用样本：血清、疱疹液、口腔分泌物等。
样本处理：需自行提取DNA，建议使用兼容的核酸纯化试剂盒。
操作方法
标准曲线制备：
梯度稀释阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）至6个浓度（10^7~10^2拷贝/μL）。
每管加入45 μL模板稀释液及5 μL稀释后阳性对照，震荡混匀。
PCR反应体系：
按20 μL/反应配制，含VZV反应液、酶液及待测DNA模板。
扩增程序：
预变性：95℃ 2分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40个循环）。
结果判读
定量分析：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算待测样本浓度。
定性分析：
阳性：Ct值≤35，且有典型扩增曲线；
阴性：Ct值≥40；
可疑（35<Ct<40）：需重复检测，重复后Ct<40判为阳性。
注意事项
不同批号试剂不可混用。
操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。
若用于疫苗株检测，需确认引物探针与疫苗株序列匹配。
性能参数
灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的病毒DNA。
特异性：与相关病毒无交叉反应。
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关键字： 水痘-带状疱疹病毒疫苗株;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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