预期用途
用于科研领域HPyV9核酸的定性及定量检测,不适用于临床诊断。
产品名称
人多瘤病毒9 染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Human Polyomavirus 9 (HPyV9) Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3293
检验原理
采用SYBR Green I荧光染料法,通过设计HPyV9特异性引物,在PCR扩增过程中与双链DNA结合释放荧光信号,经实时荧光定量PCR仪监测,实现靶基因的灵敏检测。
试剂盒组分
HPyV9预混反应液(含SYBR Green I、dNTPs、Taq酶、ROX参比染料)
HPyV9特异性引物(上游/下游,10 μM各200 μL)
阳性质控品(HPyV9基因片段,50 μL)
阴性质控品(无核酸酶水,50 μL)
说明书
操作步骤
样本处理:提取待测样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制(20μL体系):
预混反应液:10 μL
引物混合液:1 μL(各0.5 μL)
DNA模板:2 μL
无核酸酶水:7 μL
PCR程序:
预变性:95℃ 3分钟
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(荧光采集)
熔解曲线分析:60℃至95℃,梯度升温0.5℃/秒
质量控制
阳性质控:Ct值≤30且熔解曲线为单一峰。
阴性质控:无扩增曲线。
储存与稳定性
-20℃避光保存,避免反复冻融(≤7次),有效期12个月。
适用仪器
兼容ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler等主流荧光定量PCR仪。
注意事项
实验需在无污染环境下操作,建议使用滤芯吸头。
不同批号试剂不可混用。
熔解曲线出现多峰提示非特异性扩增,需优化条件。
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