梅克尔多元癌细胞病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 梅克尔多元癌细胞病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Merkel Cell Polyomavirus (MCPyV) Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3384 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于检测梅克尔多元癌细胞病毒（MCPyV）RNA，具有高灵敏度和特异性。适用于科研领域，不可用于临床诊断。
检测原理
探针法原理：
探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。
PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，实时监测扩增进程。
定量分析：通过荧光强度变化（ΔRn）与循环阈值（Ct值）计算起始模板量。
产品特点
即开即用：预混优化引物、探针及反应缓冲液，仅需提供RNA模板。
高灵敏度：检测下限可达10拷贝/μL。
特异性强：引物针对MCPyV保守区设计，避免与其他病毒RNA交叉反应。
质控完善：含阳性对照，有效区分假阴性结果。
试剂盒组分
| 成分 | 规格 |
| qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| 酶混合液（含Taq酶） | 100μL |
| 模板稀释液 | 1mL |
| MCPyV探针混合液 | 50μL（10μM） |
| 阳性对照RNA | 50μL（1×10^5 copies/μL） |
操作步骤
RNA提取：使用常规方法提取样本RNA。
反应体系配制（20μL/反应）：
缓冲液10μL + 酶混合液2μL + 探针混合液1μL + RNA模板5μL + 无核酸酶水2μL。
PCR程序：
反转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 2分钟 → 循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光）。
注意事项
实验需在无核酸污染环境下进行，建议使用UDG防污染系统。
避免反复冻融试剂，分装后使用。
阳性对照需与待测样本分区域操作，防止交叉污染。
性能参数
线性范围：10^1–10^7 copies/μL（R²≥0.99）。
重复性：批内CV≤5%，批间CV≤10%。
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