产品特点

即开即用:仅需提供样品DNA模板,无需额外优化引物或反应体系。
高灵敏度:引物经特异性优化,检测限低,可精准识别低拷贝目标序列。
质控完善:提供阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),有效区分假阴性结果。
高特异性:引物基于高度保守区设计,避免与其他微生物DNA/RNA交叉反应。
双重检测功能:支持定性和定量分析,定量线性范围达5个数量级。
兼容性强:适配多数核酸纯化方法,适用于20μL标准反应体系。
产品名称 | 彭氏变形菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Proteus penneri Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3327 |

操作方法

标准曲线制备
标记6支离心管(编号7至2),每管加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液。
梯度稀释阳性对照:
7号管:加入5 μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀,得1×10⁷拷贝/μL标准品。
依次稀释至6号管(1×10⁶拷贝/μL)、5号管(1×10⁵拷贝/μL),直至2号管,每次更换枪头。
稀释完成后,所有标准品置于冰上备用。
样品DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取样品DNA。
若检测N个样品,需制备N+2份(含阳性/阴性对照各1份)。
qPCR反应设置(20μL体系)
定量分析:标记N+9个反应管(N+2样品管、1阴性对照管、6标准曲线管)。
定性分析:可仅选1个标准曲线管(如4号管)。
反应条件:按仪器说明书设置扩增程序(建议预变性95℃ 2分钟,后续循环40次)。
注意事项

操作全程需在无菌环境下进行,避免气溶胶污染。
试剂解冻后需轻柔混匀,避免剧烈震荡或反复冻融。
标准曲线样品需现配现用,长期保存可能影响定量准确性。
实验重复建议≥3次,确保数据可靠性。
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