产品用途
科研实验，用于检测黑色普雷沃菌（Prevotella melaninogenica）的DNA定量分析。
产品名称
黑色普雷沃菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Prevotella melaninogenica Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3331
试剂盒组成
qPCR预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料（如SYBR Green）。
阳性对照：10^8拷贝/μL的DNA片段（非活体样本，避免生物污染）。
阴性对照：超纯水或无模板对照（NTC）。
荧光PCR专用模板稀释液：用于标准品梯度稀释。
实验操作步骤
标准品稀释（以10^2–10^7拷贝/μL为例）
标记6支离心管（7–2号），每管加入45 μL模板稀释液。
取5 μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10^7拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管（10^2拷贝/μL），每次更换枪头，冰上暂存。
反应体系配制（50 μL体系）
| 组分 | 体积（μL） |
| qPCR预混液 | 25 |
| 引物混合液 | 3 |
| 待测DNA样本/标准品 | 7 |
| 超纯水 | 补足至50 |
PCR扩增程序
预变性：95℃, 5分钟；
循环阶段（40个循环）：
95℃, 15秒（变性）；
58℃, 15秒（退火）；
72℃, 30秒（延伸，采集荧光信号）。
数据分析
质控要求：
阳性对照Ct值需在预期范围内，阴性对照无扩增信号。
若对照异常，实验无效，需排查污染或联系技术支持。
定量分析：
以标准品log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线。
通过待测样本Ct值计算DNA浓度。
注意事项
操作分区进行，避免气溶胶污染。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。
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