田鼠痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 田鼠痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Volepox Virus Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3415 |
产品用途
本试剂盒专用于田鼠痘病毒核酸的荧光定量PCR检测，适用于科研领域，不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测病毒DNA模板。
高特异性：基于田鼠痘病毒保守序列设计引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。
闭管检测：一管式操作，避免扩增产物污染。
稳定可靠：提供预混反应体系，重复性好。
规格与成分
2×qPCR MagicMix：500 μL（棕色管，含荧光染料、dNTPs、耐热DNA聚合酶）。
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（黄盖）。
田鼠痘病毒引物混合物：100 μL（白盖，含特异性引物及探针）。
阳性对照（1×10^8拷贝/μL）：50 μL（红盖，非活体DNA片段）。
使用手册：1份。
运输与保存
运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
自备试剂
DNA模板（待测样本）。
10×ROX校正染料（依机型需求，参见仪器说明书）。
操作步骤
阳性对照稀释（10^2~10^7拷贝/μL梯度制备）
注意事项：在独立洁净区操作，避免污染试剂盒其他组分。
标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL模板稀释液。
梯度稀释：
7号管：加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀，得10^7拷贝/μL溶液。
依次转移5 μL至下一管，稀释至2号管（10^2拷贝/μL）。
稀释后所有管置于冰上备用。
PCR反应体系配制
按以下比例配制反应液（单次20 μL体系）：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：2 μL
模板DNA：2 μL（待测样本或阳性对照）
ROX（可选）：依机型添加
无核酸酶水：补至20 μL
短暂离心混匀，避免气泡。
荧光定量PCR程序
预变性：95℃ 3分钟。
循环步骤（40次）：
95℃ 15秒（变性）
60℃ 60秒（退火/延伸，采集荧光信号）
数据分析：使用仪器配套软件，以Ct值定量病毒拷贝数。
注意事项
所有操作需符合分子生物学实验室规范，防止交叉污染。
阳性对照为DNA片段，无生物传染风险，但仍需按有害物质处理。
反应体系分装建议使用带滤芯枪头。
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