拉沙热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 拉沙热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Lassa Fever Virus (LASV) Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3435 |
产品原理
本试剂盒采用SYBR Green I荧光染料法，通过一步式RT-qPCR技术实现拉沙热病毒RNA的高灵敏度检测。试剂盒整合耐热逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶，可在单管内完成cDNA合成与定量扩增，减少污染风险。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 20 T规格含量 | 200 T规格含量 |
| A | 2× Advanced SG Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |
| B | UH Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |
| C | RNase-free H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
性能参数
灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或1 pg（中等表达靶标）。
特异性：熔解曲线分析确保扩增产物单一性，避免非特异性扩增。
重复性：复孔间Ct值差异≤0.5（高/中/低浓度模板）。
兼容性：适配主流荧光定量PCR仪（No Rox/Low Rox/High Rox平台）。
操作流程
反应体系配制（20 μL/反应）：
2× SG Buffer 10 μL
UH Enzyme Mix 0.5 μL
引物（10 μM）各0.4 μL
RNA模板 ≤2 μL
RNase-free H2O 补至20 μL
反应程序：
逆转录：50℃ 15 min
预变性：95℃ 5 min
扩增（40循环）：95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec（信号采集）
熔解曲线分析：60℃~95℃（梯度升温）
数据分析
定量检测：以阳性标准品Ct值绘制标准曲线，计算待测样本浓度。
定性判定：
阴性：Ct≥40或无扩增曲线；
阳性：Ct≤35且曲线呈指数增长；
灰区（35<Ct<40）：需复测确认。
注意事项
本产品仅限研究使用，不可用于临床诊断。
操作需在无RNase环境下进行，建议使用防污染试剂（如UDG酶）。
熔解曲线出现多峰时，需优化引物或重新提取RNA。
应用案例
适用于拉沙热病毒感染的细胞培养物、动物组织或临床样本的快速筛查与定量分析。
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