脲原体通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 脲原体通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Ureaplasma spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3438 |
产品介绍
本试剂盒基于SYBR Green I荧光染料法，专用于脲原体（Ureaplasma spp.）核酸的快速、高灵敏度定量检测。通过优化引物设计及反应体系，可特异性识别脲原体保守基因序列，避免与其他微生物DNA/RNA的交叉反应。适用于临床样本、环境样本或培养物中脲原体的定性和定量分析。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 规格（20 T） |
| A | 2× qPCR Master Mix（含SYBR Green I） | 250 μL |
| B | 脲原体特异性引物混合液 | 20 μL |
| C | 阳性对照（无传染性DNA片段） | 50 μL（1×10^8 copies/μL） |
| D | RNase/DNase Free H₂O | 250 μL |
技术参数
灵敏度：可检测低至0.1 pg脲原体DNA或10^2 copies/μL的靶标。
特异性：引物经生物信息学验证，仅与脲原体属基因匹配。
线性范围：标准曲线覆盖10^2–10^7 copies/μL，R²≥0.99。
稳定性：预混液在4℃下可稳定24小时，反复冻融≤3次。
适用仪器：兼容常见qPCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX、Roche LightCycler等）。
操作流程
样本处理：提取待测样本DNA，建议使用柱式核酸提取试剂盒。
标准曲线制备：将阳性对照按10倍梯度稀释（10^7–10^2 copies/μL），每个梯度设3复孔。
反应体系（20 μL）：
2× Master Mix：10 μL
引物混合液：2 μL
模板DNA：2 μL
H₂O：6 μL
PCR程序：
预变性：95℃ 5 min
循环：95℃ 10 s → 60℃ 30 s（40 cycles）
熔解曲线分析：60–95℃（0.5℃/s）
注意事项
用途限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
污染控制：操作分区进行，避免气溶胶污染；建议使用带滤芯枪头。
结果判读：Ct值≤35且熔解曲线单峰视为阳性；阴性对照Ct值应≥40或无扩增。
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